利用随机突变和定点突变筛选硝磺草酮高抗性对羟基苯丙酮酸双加氧酶开题报告

 2022-01-26 11:27:43

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

hppd(4-羟基苯基丙酮酸双氧化酶)是一种铁-酪氨酸蛋白,参与对羟苯基丙酮酸转化为尿黑酸的过程[1]。hppd抑制剂主要作用是防止植物类胡萝卜素的色素形成,从而导致叶绿素的降解,最终植物会因白化无法进行光合作用而死亡 [2-3]。长期使用的除草剂,如百草枯,使植物产生抗性,除草效果不佳[4]。hppd作为新型靶标酶被推广应用。hppd抑制剂作用的尿黑酸形成过程存在于多数植物中,因此在消除杂草时也会对正常作物造成伤害[5]。本研究通过定点突变对hppd进行定点突变,构建具有hppd抑制剂抗性的转基因植物可以有效保护作物正常生长,同时扩大hppd抑制剂除草范围。

目前发现的hppd抑制剂除草剂以三酮类为主 [6]。国外已有研究利用定点突变的方法,筛选抗性高于野生型的菌株,将其突变基因导入植物中表达。此项研究结果已经在国外申请专利[7]。国内有关除草剂抗性hppd基因筛选和利用的报道很少,本研究为构建具有hppd抑制剂抗性的转基因植物提供基因资源。

[1]巫俭, 陈运谋, 覃少球, 等. raney-cu催化二乙醇胺脱氢氧化生产亚氨基二乙酸的研究[j]. 广西化工, 2000, 29(3).5-6

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2. 研究的基本内容和问题

(一)研究目标

筛选获得具有硝磺草酮高抗性的hppd突变体

(二)研究内容

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3. 研究的方法与方案

研究方法:

(1)随机突变和定点突变产生硝磺草酮高抗性基因phppd

(2)野生型和突变体hppd的诱导表达

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4. 研究创新点

国内有关除草剂抗性HPPD基因筛选和利用的报道很少,本研究为构建具有HPPD抑制剂抗性的转基因植物提供基因资源。

5. 研究计划与进展

2014年8月2014年10月

查阅国内外相关的文献,设计实验方案,实验材料的收集,学习相关生物信息学软件;

2014年10月2014年12月

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