1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
在多种影响作物产量的胁迫中,盐害是主要的威胁。
根据联合国粮食及农业组织的数据,世界6%的土地面积和20%的灌溉地被高盐影响。
高盐的土壤不仅减少了作物吸取水分和矿物质营养的能力,还减少了植物生产力。
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2. 研究的基本内容和问题
根据已得GmSOS1基因序列,进行生物信息学分析,克隆该基因CDS全长,构建植物表达载体,在亚细胞水平上对其表达蛋白进行定位。
3. 研究的方法与方案
(1)以获得的全长序列进行生物信息学分析。
(2)构建pyes-2-gmsos1载体转入酵母菌株构建酵母过表达载体,以空载为对照,经70%mmol/l氯化钠处理后转入ypda培养基中培养。
(3)设计含酶切位点引物,扩增全长,将其连接ps1agfp-8表达载体,转化烟草表皮细胞,表达融合蛋白,通过荧光显微镜等设备,借助绿色荧光蛋白发出荧光的特性来定位gmsos1蛋白。
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4. 研究创新点
SOS1蛋白在多种植物如拟南芥、水稻、菊花等中的作用位置已经得到研究,但是本实验室所进行的对大豆SOS1蛋白的功能研究及本课题对大豆SOS1作用位置的研究尚属首次探索。
5. 研究计划与进展
2014年09月~2014年10月:熟悉实验室环境,查阅相关文献。
2014年10月~2014年11月:完成文献综述和开题报告,预备实验和部分正式实验。
2014年11月~2015年1月:进一步完善实验。
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