1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode)是昆虫的重要天敌类群之一，现已发现3000种以上的昆虫被线虫寄生，被寄生昆虫主要表现为生长发育不良、生殖力减退、畸形或死亡。
鉴于昆虫病原线虫寄主范围广，对人畜无害，不污染环境，杀虫速度快且能以低成本大规模生产等优点，其在害虫防治上的应用已逐渐引起人们的重视。
昆虫病原线虫共生细菌寄生于昆虫病原线虫肠道内，二者互惠共生。
2. 研究的基本内容和问题
崇明拟异小杆线虫经过高通量测序获得34个新型miRNA,我们推测昆虫病原线虫与共生菌的共生与这些新型miRNA有着极为密切的关系，因此我们从miRNA前体结构，miRNA前体的最小自由能，miRNA家族成员对这些新型miRNA进行了综合的分析，并且挑选其中五个表达量高的miRNA,探讨这五个新型miRNA对线虫与共生菌共生的影响，构建了这五个新型miRNA的过表达载体，用于后续与靶基因互作的功能验证。
3. 研究的方法与方案
1.线虫学实验1.1线虫的繁殖与保存所有进行研究的线虫均用大蜡螟进行繁殖。
在铺有2张湿滤纸的培养皿 (6015 mm) 里将15条大蜡螟暴露在大约2000条侵染期线虫的周围并放于20 3 ℃培养箱中保湿培养。
雌雄同体线虫和第1代成体线虫各自通过解剖被侵染的大蜡螟收集。
4. 研究创新点
崇明拟异小杆线虫经过高通量测序获得34个新型miRNA,我们推测昆虫病原线虫与共生菌的共生与这些新型miRNA有着极为密切的关系，因此我们从miRNA前体结构，miRNA前体的最小自由能，miRNA家族成员对这些新型miRNA进行了综合的分析，并且挑选其中五个表达量高的miRNA,探讨这五个新型miRNA对线虫与共生菌共生的影响，构建了这五个新型miRNA的过表达载体，用于后续与靶基因互作的功能验证。
5. 研究计划与进展
六、研究计划及预期进展2014.10-2014.11 昆虫病原线虫及共生菌的不同组合混合培养；2014.12-2015.1荧光定量测定mirna表达量的变化以及mirna的分析；2015.1-2015.2 过表达载体的构建；2015.3-2015.4 补充实验，论文的写作及答辩。
预期进展从mirna前体结构，mirna前体的最小自由能，mirna家族成员对这些新型mirna进行了综合的分析，从而了解mirna与靶基因可能具有的相互作用，从而预测靶基因。
构建mirna的过表达载体，其中mirna的质粒载体为l4440，其上带有绿色荧光蛋白基因，作为报告基因。
