1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义:
油料作物包括油菜、花生、芝麻等,而油菜作为其中之一,属于十字花科芸墓属。栽培油菜有三种类型,分别是甘蓝型油菜(brassica napus)、芥菜型油菜(b.juncea)和白菜型油菜(b.campestris) [1]。转基因油菜由于两方面的原因,使其容易造成基因漂移,一是油菜收获时有小部分种子洒落在田地,进入次生休眠状态,待其若干年后,萌发生长成自生苗,从而逸生为杂草;二是油菜为常异花授粉植物,其花粉可通过昆虫传播到距离较远的野生近缘中,发生杂交现象,产生携带抗性基因的杂交后代,给农田杂草防除带来新的难题[2] 。因此有必要关注转基因油菜的生态安全性。
虽然目前我国尚没有转基因油菜的商业化种植,但我国在转基因油菜籽的商业进口上颇为频繁,在转基因油菜籽运输和加工过程中种子很可能洒落而发生逃逸,因而存在基因漂移可能性。国外已有较多转基因油菜种子在运输过程中发生基因逃逸的报道[3]。同时个别的实验不规范或者在环境释放阶段,也有可能会造成基因逃逸。因此开展转基因油菜的抗性基因漂移具有重要意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:
对抗除草剂转基因油菜中的抗性基因在转基因油菜以及近缘杂草野芥菜中的带抗性基因的回交1代子3代、回交2代子2代、回交3代子1代在温室条件下的适合度进行连续跟踪研究;同时研究抗草甘膦基因在回交1代子4代、回交2代子3代、回交3代子2代中的遗传规律、,为抗除草剂转基因油菜的抗性基因向野芥菜的渗入提供科学依据。
研究内容:
3. 研究的方法与方案
研究方法与实验方案:
1)实验材料:抗草甘膦转基因油菜(brassica napus l.;genome,aacc;ds-roughrider,roundup ready,event rt73 来自加拿大,rt73是纯合的、含有一个完整的cp4 epsps 和gox基因,以及它们各自的调控基因。野芥菜(b. juncea var. gracilis)采集于南京江浦,以正反回交1代子3代(bc1f4)、代、回交2代子2代(bc2f3)、回交3代子1代(bc3f2)为实验材料。
2)材料种植:在南京农业大学牌楼玻璃温室进行。从经过抗性筛选和抗性检测后存活下来的植株中挑选生长健壮、大小适中的植株,按照实验设计进行盆钵移栽。盆钵中所用土壤来源一致均为菜园土,且事先与腐殖质按1:1比例混合均匀。所用盆钵大小一致(口径23cm,深24cm)。每盆移栽一株。抗性油菜、野芥菜各移栽20株,每种后代各移栽60株。开花期时对各植株进行套袋自交防止窜粉,成熟后整株收获考种并收取种子。
4. 研究创新点
特色或创新之处:本项目以抗草甘膦转基因油菜的BC1-3自交产生的子代为材料,研究抗性基因在回交代子代中的传递频率,在温室条件下的适合度、,分析回交代随着自交代数的增加,抗性基因的传递、后代适合度的变化规律,探索抗草甘膦转基因油菜的抗除草剂基因渗入到野芥菜中的过程,为抗除草剂转基因油菜基因安全性评估提供更科学和深入的依据。
5. 研究计划与进展
2012-9至2012-12,查阅相关文献。种植回交1代子3代、回交2代子2代、回交3代子1代试验材料,抗性筛选
2013.1至2013-8,移栽试验材料,测定适合度指标。
2013.9-至2014-1,种植回交1代子4代、回交2代子3代以及回交3代子2代,进行抗性筛选,完成实验。
