1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
研究意义cdh22基因的编码产物在大鼠中存在两种剪切形式，其中stpb-c（short-type pb-cadherin）通过相关信号通路能促进大鼠睾丸中精原细胞的自我更新。
cdh22在大鼠中的功能和生物学机制已经非常明确，但在小鼠中该基因只表达一种编码产物，其生物学功能尚不明确。
因此以3t3细胞为研究对象，通过rna干扰技术来研究小鼠中cdh22敲低后对细胞分裂的影响以及所涉及的信号通路。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：初步研究干扰cdh22基因的表达后对细胞的影响及相关信号通路的变化。
研究内容：（1） 构建慢病毒介导的cdh22基因的shrna干扰载体；（2） 检测cdh22基因的knock-down效率；（3） 检测cdh22基因knock-down后对细胞及其下游基因的影响。
拟解决的关键问题：（1）慢病毒感染3t3细胞的效率；（2）cdh22基因knock-down的效率；（3）cdh22基因knock-down后stat3的变化。
3. 研究的方法与方案
研究方法：a) 基因knock-down； b) 慢病毒载体构建；c) rt-pcr检测cdh22 knock-down后的3t3细胞中cdh22 mrna的表达； d）western-blot检测cdh22 knock-down后的3t3细胞中cdh22蛋白质的表达。
技术路线（见附件）实验方案（1）cdh22 基因慢病毒载体的构建针对cdh22基因的orf 区域( 开放阅读框区域) 设计特异性干扰shrna 片段，通过genbank 数据库进行blast 分析, 确定其与其它基因没有非特异性的干扰后, 委托公司合成。
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4. 研究创新点
特色或创新之处（1）本实验采用慢病毒载体，它是目前感染效率最高的载体, 具有感染分裂和非分裂细胞的能力, 且目的基因整合至靶细胞基因组可长期表达、免疫反应小等优点。
（2）研究Cdh22基因及其下游调控基因的关系，Cdh22基因是一个与干细胞自我更新有关的基因，研究其调控机制有利于揭示干细胞自我更新的调控机制。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2015年3月17日 至2015年4月10日 完成载体的构建及病毒包装2015年4月11日 至2015年4月25日完成细胞感染及相关测定实验2015年4月26日 至2016年5月15日数据整理及毕业论文的撰写
