1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
猪支原体肺炎(mycoplasmal pneumona of swine,mps)又名猪气喘病或者地方流行性肺炎(swine en-zootic pneumonia),是由猪肺炎支原体(mycoplasma hyopneumoniae,mhp)引起的一种接触性慢性呼吸道传染病。
本病遍布全球,发病率较高,并且易引起其它疾病的继发感染,给养猪业造成巨大的经济损失[1]。
我国自主研发的猪支原体肺炎疫苗主要有猪肺炎支原体168株无细胞培养弱毒疫苗和猪支原体肺炎rm48株弱毒苗。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标本研究中,通过压力喷雾器及超声雾化器的雾化,制备猪支原体肺炎气溶胶活疫苗;通过CCU方法,研究使用保护剂(5%甘油)和未使用保护剂对猪支原体肺炎168株冻干疫苗雾化前后活力的影响,为临床气雾免疫的应用提供参考。
2.研究内容(1)气溶胶活疫苗的制备(2)CCU50法测雾化前后的支原体滴度(3)荧光定量PCR测雾化前后支原体拷贝数(4)综合分析雾化前后支原体活力的损失情况3.拟解决的问题 制备猪支原体肺炎气溶胶活疫苗并对雾化前后疫苗活力进行鉴定、分析。
3. 研究的方法与方案
1. 研究方法和方案(1)使用pari压力喷雾器雾化实验在经紫外消毒的细胞间进行,雾化箱提前在细胞间内经75%酒精喷洒消毒与紫外消毒。
制备的喷雾样品倒入pari压力喷雾器中,在压力为0.2bar下雾化,将雾化器的气溶胶出口连接一个空气模型箱子(60.3cmx60.3cmx120.5cm,v=438.1l),雾化时间为5min。
雾化5min后进行样品采集。
4. 研究创新点
对猪支原体肺炎气溶胶活疫苗的研究在国内处于领先水平,针对气溶胶活疫苗的制备和雾化前后活性检测,为猪支原体肺炎168株冻干疫苗气雾免疫的临床应用提供参考。
5. 研究计划与进展
2015.10-2015.11 查阅文献,熟悉实验操作技术、实验流程及注意事项。
2015.11-2015.12 进行猪支原体肺炎168株冻干苗雾化前后活力变化试验。
2015.12-2016.4分析实验结果,必要时重复部分实验,撰写论文。
