1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
近年来，我国部分地区商品雏鹅群陆续发生高度致死性内脏痛风病，给养鹅业造成了巨大的经济损失。该病以组织脏器及腿部肌肉、关节覆盖大量尿酸盐沉积物为特征，主要感染３周龄以内的雏鹅，感染鹅群死亡率可高达３０％。本研究对雏鹅内脏痛风病的致病病原进行了鉴定，同时开展了病原检测及防控方面的研究工作，对有效的防控鹅内脏痛风病具有重大的意义。
1995年，国际病毒分类学委员会在第六次报告中将星状病毒划入新建的星状病毒科,该科仅包含一个属，即星状病毒属。星状病毒科在随后数年内经过多次的调整,最终于2004年根据其感染宿主的不同将其划分成两个不同的病毒属：哺乳动物星状病毒属和禽星状病毒属。2010年，ictv星状病毒研究小组进一步改进了分类系统，将orf２全长氨基酸序列作为星状病毒种内进一步划分的依据，规定其平均氨基酸距离在0.368-0.781之间可以划分为不同的星状病毒种,同时也为种内不同变异株的识别提供了参考意见。
2. 研究的基本内容和问题
近年来我国多地的雏鹅群中发生一种以内脏和关节痛风为主要症状的传染性疾病，给我国养鹅业造成严重经济损失。该病主要发生于 ５～２０ 日龄的雏鹅，死亡率最高可达５０％。患病雏鹅精神沉郁，卧地倦动，采食减少。剖检表现为内脏器官及关节腔的严重尿酸盐沉积，不同品种、使用不同饲料、不同药物的鹅群均有发生，降低饲料中的蛋白含量、减少饲喂量均无效。该病发生后，本实验室从多地发生痛风的鹅场采集病料，对采集的病料进行了病原分离和动物回归试验，争取确诊导致发病病原体主要为鹅星状病毒，从而为痛风病的防控奠定了基础。
本次毕设首先通过细菌学培养排除常见细菌感染，之后采用PCR技术从发病鹅病料中检测到星状病毒基因片段，并在此基础上开展病毒的分离和鉴定工作。
3. 研究的方法与方案
对星状病毒进行分离鉴定，从病料，主要是尿囊液中提取rna，再进行反转录，pcr大量扩增目的片段，核酸电泳进行鉴定，然后连接t载体进行测序分析，比对现有序列，找到其所属毒株。
再选取阳性强的样用超速理性机蔗糖梯度离心纯化病毒，再进行电镜分析观察病毒形态。理想状态下纯化后的病毒应只能发现单一形态的病毒粒子，并且更多杂质也都应当沉淀下来故视野比较清晰。
星状病毒病毒粒子冷冻电子显微镜下观察呈现布满纤突结构的坚壳，病毒由衣壳蛋白组装而成，衣壳蛋白作为星状病毒的结构屏障，不仅可以包裹病毒核酸，而且通过与宿主相互作用来决定细胞向性介导细胞入侵，并且激发宿主的免疫应答。衣壳蛋白为向导ＲＮＡ翻译的广物，该蛋白包含尚度保守的Ｎ端区域和高度变异的Ｃ端区域：Ｎ端富含碱性氨基酸，能够参与病毒基因组的包装与衣壳芯的形成；Ｃ端主要形成纤突结构，同时末端包含一个酸性区域，该区域包含几个潜在的细胞半胱天冬酶加工位点，并且能够通过内质网靶向基序促使vp90迅速进入宿主膜结构，使得衣壳蛋白组装与病毒基因组复制能够在细胞内同步进行目前关于病毒衣壳蛋白晶体结构解析方面的报道还相对较少，主要集中于对人星状病毒衣壳蛋白的解析，利用蛋白晶体结构解析技术，使我们对星状病毒衣壳蛋白的成熟过程及蛋白功能有了新的了解.
4. 研究创新点
首先在发病鹅的病料中分离鉴定并确定为星状病毒，然后再进行其他一系列鉴定实验确认星状病毒是否为导致鹅痛风的唯一病因，从而能为临床上乃至生产上再次大规模爆发鹅的痛风性疾病起到一系列指导性的作用。
5. 研究计划与进展
1.临床发病鹅病料及其尿囊液分离鹅星状病毒的纯粹性检验。（1）纯化病毒电镜观察病毒粒子形态；（2）无菌检验；（3）血凝试验检测是否纯在血凝活性病毒；（4）已知其它鹅病毒的基因检测，pcr方法。（2019.03.01-03.31）
2.鹅星状病毒分离株的全基因组测序及基因序列特征分析。（2019.03.01-03.31）
3.鹅星状病毒分离株的生物学特性研究。（1）接种鹅胚传代的繁殖特性；（2）分离病毒的细胞适应性能；（3）分离病毒对雏鹅的致病特性及病理组织学特征。（2019.04.01-04.30）
