1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1. 课题意义
马铃薯是仅次于水稻、小麦和玉米的第四大经济作物,是世界上种植面积最广和食用国家最多的作物。与其它主粮相比,马铃薯高产稳产,适应性广,营养成分丰富齐全、结构合理,且蛋白质和糖类含量远超一般蔬菜,是接近全价的营养食物。因此马铃薯相关产业也受到全世界的高度重视。随着对马铃薯需求的增高,提高马铃薯的产量是研究者们关注的热点问题。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究目标
通过分子生物学、生物化学以及生物信息学等研究手段探究转录因子bes1与热激转录因子基因hsfs启动子区域的互作关系,从而探究bes1调控hsfs表达的分子机制。
2. 研究内容
3. 研究的方法与方案
实验方法:
1.dna与蛋白质互作技术探究bes1与hsfs启动子区域的关系
利用双荧光素酶的方法探究bes1与hsfs启动子之间的关系。通过前期实验分析,初步选定马铃薯内9个bes1基因中的bes1-2进行克隆并构建到pcambia1300载体上。重点选取同时受热和br诱导的hsf018和hsf026,分别克隆其启动子并构建到双荧光素酶载体pgreenⅡ 0800-luc上(hsf启动子插入位点在两个荧光素酶rluc与luciferase中间)。以空载作为对照,将构建好的pcambia1300载体和pgreenⅡ 0800-luc分别转化进农杆菌gv3101中。转化成功后用该农杆菌侵染烟草,并用双荧光素酶检测荧光试剂盒检测荧光,验证bes1-2对hsf018和hsf026表达的影响。
4. 研究创新点
特色及创新
本项目着重研究油菜素甾醇调控马铃薯耐热的相关研究,表型层面影响与分子生化层面的影响相结合,具有全面性。将油菜素甾醇信号通路中下游的转录因子BES1与Hsfs联系起来,从而探究清楚整条信号通路是本项目的特色之处。首次从分子层面探明油菜素甾醇调控马铃薯耐热的信号通路是本项目的创新之处。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
研究计划:
2019.09.25-2019.10.30
