1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1. 本课题研究意义cat在不同植物组织的不同发育阶段发挥着多种功能，而且多种过氧化氢酶同工酶是由一个多基因家族成员编码的，因此确定单个基因和同工酶的特定功能非常困难。
拟南芥三个cat同工酶间的功能互补和重叠性，也可能限制了拟南芥cat活性缺失突变体的鉴定和分离。
利用激光共聚焦技术和pan580载体，对cat3基因进行基因定位，为进一步研究拟南芥cat3的生物学功能和过氧化氢在植物中的信号转导机制提供基础。
2. 研究的基本内容和问题
1. 研究的目标利用激光共聚焦技术对拟南芥的cat3基因进行基因定位，为研究cat3在调控机理和信号通路方面的作用打下基础。
2. 研究内容利用pan580质粒构建拟南芥cat3载体，并转化至大肠杆菌感受态细胞中，通过抗性和报道基因结果筛选出质粒转化成功的大肠杆菌，通过测序确定，再通过提取质粒转化进入拟南芥原生质体并通过激光共聚焦进行基因定位。
3. 拟解决的关键问题过氧化氢酶是分解过氧化氢的关键酶，本课题期望利用激光共聚焦技术对cat3基因进行基因定位，继而研究cat3在植物细胞中对植物生理功能的影响，以及cat3在细胞信号通路与细胞生理调控中的作用。
3. 研究的方法与方案
1 研究方法trizol法提取叶片总rna；反转录酶合成cdna；pcr克隆cdna并构建重组载体；质粒转化大肠杆菌；碱裂解法提取大肠杆菌质粒；拟南芥原生质亚细胞定位。
2 技术路线 3实验方案3.1 rna的提取提取rna所用的离心管、枪头及无菌水等均经过0.2%焦碳酸二乙酯过夜处理，高压蒸汽灭菌（121℃, 20 min），烘干备用。
总rna的提取参照提取试剂trizol使用说明书进行。
4. 研究创新点
关于CAT3的研究近些年才逐渐增多，所以对于拟南芥中CAT3基因的基因定位并没有十分完善。
本课题期望能够发通过激光共聚焦技术对拟南芥中的CAT3基因进行基因定位从而提供该研究领域的新进展和新内容。
5. 研究计划与进展
2017.03至2017.04 克隆CAT3；构建载体；提取总RNA并合成cDNA；制备大肠杆菌感受态并转化pAN580-CAT3载体；涂布筛选得到目的菌落，提取质粒后送公司测序分析2017.04至2017.05制备大肠杆菌感受态并转化pAN580-CAT3载体；涂布筛选得到目的菌落，提取质粒后送公司测序分析；制备拟南芥原生质体，并进行基因定位
