1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
hak/kup/kt钾转运体属于转运氨基酸-多胺-金属阳离子的apc家族转运体,其运输方式为次级主动转运。
植物基因组编码了大量hak/kup/kt转运体,它们在k 的吸收和转运,响应盐胁迫和渗透调节等方面发挥功能并且还参与控制根系形态和幼苗表型。
最近,hak/kup/kt 转运体在转录和翻译后水平的调节机制已经取得了显著进展。
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2. 研究的基本内容和问题
对目的基因进行定位,并通过不同体系异源系统鉴定转运钾的能力提高盐渍化土壤的有效利用途径应该是通过作物育种提高植物本身的耐盐性。
根据往年植物电生理学和分子遗传学的研究进展,植物胞质中维持较高的k /na 比率的能力对于植物的耐盐机制至关重要。
在水稻中,已经存在有力的证据表明oshak5参与了k 从根部向地上部分的转运。
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3. 研究的方法与方案
通过对 OsHAKb 表达部位和生理功能两个方面进行详细研究,通过对OsHAKb 的表达模式分析,组织和亚细胞定位分析,在异源体系中的功能验证,以及创制 OsHAKb 超表达、突变体水稻材料进行表型分析,揭示了高亲和钾离子转运蛋白基因 OsHAKb 在水稻中的生理功能。
融合表达载体的构建,酵母悬浮细胞的培养和目的基因的转化,OsHAKb缺失和过表达细胞培养对比,OsHAKb基因表达模式分析,亚细胞定位分析,组织定位分析
4. 研究创新点
1.为 hak 家族成员参与响应盐胁迫提供了重要的遗传学证据。
在植株水平上, 证实了钾的吸收和转运对植物耐盐性具有重要意义。
阐明了盐胁迫下 oshakb 的生理功能。
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5. 研究计划与进展
OsHAKb 酵母表达载体的构建OsHAKb 基因的酵母转化及转化子鉴定OsHAKb 酵母转化子对盐敏感酵母突变体的回补试验钠敏感酵母转化子和空载体的离子浓度测定同期进行蛙卵等不同体系的基因研究
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