1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题意义：胱硫醚β合酶（cystathionine beta-synthase,cbs）是同型半胱氨酸（homocysteine,hcy）转硫代谢途径中的关键酶，并将其转化为半胱氨酸（cysteine，cys）。
因cbs基因突变等因素，其酶活性会下降并容易导致hcy在体内积累过多，从而形成高同型半胱氨酸血症，并极易引发动脉粥样硬化（atherosclerosis，as），严重威胁人类健康。
因此，cbs的生物学结构、性质和功能对于维持血浆中正常的hcy水平至为关键，对于人类的相关疾病预防和研究具有十分重要的意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：cbs在人体内转硫过程中发挥着重要的作用，cbs的活性降低，导致hcy的大量积累，而高hcy是导致动脉粥样硬化的独立危险因子，因而cbs与动脉粥样硬化之间有着千丝万缕的联系。
但由于cbs在体内含量极低，因而分离获得大量的天然产物比较困难，本课题以通过原核表达来获得并纯化有活性的cbs为目标，研究cbs的体外催化活性，确定cbs在体外的反应体系，以便进一步研究影响cbs活性的相关因子。
研究内容：①cbs基因的体外扩增②cbs基因的表达纯化③cbs的酶活测定关键问题：本课题需要解决的关键问题是：获得完整的、高质量的cbs基因。
3. 研究的方法与方案
研究方法：①基因克隆：pcr得到片段后ta克隆，测序验证。
②原核表达：设计引物，酶切酶连，转化提质粒，测序验证。
③诱导表达：大肠杆菌感染，iptg诱导，sds-page电泳。
4. 研究创新点
特色或创新之处:本课题针对性的通过对灵芝中CBS的克隆、表达及酶活测定，来创新性的探究灵芝中CBS的理论药用功能，丰富了灵芝的药用价值研究和CBS研究。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展：2017.09－2018.01获得CBS基因2018.01文献综述2018.02－2018.03 构建CBS-28a载体2018.03开题报告2018.03－2018.04 IPTG诱导，SDS-PAGE2018.04中期检查2018.04－2018.05 纯化，测定酶活2018.05论文草拟定稿2018.06论文终稿
