1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1、本课题研究意义灵芝[ganoderma lucidum (curtis: fr.) karst]隶属于真菌门（eumycota）、担子菌亚门（basidiomycotina）、层担子菌纲（hymenomycetes）、无隔担子菌亚纲（holobasidiomycetidae）、非褶菌目（aphyllophorales）、灵芝菌科（ganodermataceae）、灵芝属（ganoderma）[1]。
灵芝又别称瑞芝、仙草，是一种药食两用真菌[2]。
我国最早的药物专著《神农本草经》将灵芝列为上品，可以使人轻身不老。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标通过测定灵芝HDAC沉默菌株的次生代谢产物、纤维素酶和生长情况等指标，探讨HDAC沉默对灵芝作用。
2 研究内容1） 构建克隆HDAC沉默载体2） HDAC基因沉默对于灵芝生长的影响3） HDAC基因沉默对于灵芝三萜合成影响4） HDAC基因沉默对于灵芝纤维素酶的影响5） HDAC基因沉默对于灵芝胞内ROS水平的影响3 拟解决问题 灵芝去乙酰化酶被抑制后灵芝的灵芝酸产量和生长状况是否会改善。
3. 研究的方法与方案
1 研究方法1.1 hdac沉默载体构建在ncbi上找到灵芝hdac相关基因，设计gpd-pro引物。
依次连接19t载体和pmi沉默载体，收集质粒。
1.2灵芝脂质体转化及hdac沉默子的筛选1.2.1灵芝脂质体转化将制备好的绒毛状菌丝用溶壁酶制成原生质体，将原生质体离心所得的脂质体与准备好的pmi质粒混合进行转化，涂布平板，在28℃培养14天。
4. 研究创新点
目前关于组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的研究主要集中于哺乳动物方面，但关于大型担子菌中HDAC的研究在国内外还少有报道。
本课题以研究灵芝中HDAC对灵芝生长及三萜合成的影响为目的，为研究HDAC在大型担子菌中的作用提供数据。
5. 研究计划与进展
2017.09-2017.10熟悉实验室基本情况，查阅相关文献； 2017.10-2017.11查阅相关文献，向师兄师姐学习基本实验操作，做一些预实验，进行实验条件的摸索； 2017.11-2018.03培养灵芝g20菌株的野生型，培养hdacrnai沉默菌株。
2018.03-2018.04测定各项生理指标，研究hdac沉默后对三萜合成，纤维素酶、胞内ros含量及菌丝生长的影响。
2017.04-2017.05整理实验数据，撰写毕业论文，准备答辩。
