1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1本课题研究意义 1．1揭示水稻早期花药发育过程的转录调控开花植物产生雌雄配子体以完成双受精过程。
雄配子的正常发育对于植物形成有功能的花粉和受精后产生合子必不可少。
水稻是世界主要的粮食作物之一，研究水稻花药发育对于培养新的不育系，提高水稻产量具有重要的应用价值。
2. 研究的基本内容和问题
4研究的目标与内容4．1筛选与花药发育早期相关的ring类e3连接酶基因。
4．2 验证基因与mpl1是否存在互作。
4．3 研究基因突变对水稻花药发育的影响。
3. 研究的方法与方案
6研究方法6．1 基于rna-seq的大数据分析方法 为了能获知水稻中哪些ring类e3连接酶参与了早期花药的发育，本研究组以前的工作已将花药早期发育存在问题的突变体mpl1-1和野生型的早期花药进行rna-seq测序。
由测序结果相互比较可以得出表达有差异的基因，从中挑选出可能的ring类e3连接酶作为待验证蛋白。
6．2 基于酵母双杂交的蛋白互作验证方法为了验证筛选出的e3连接酶是否会与mpl1互作，本课题首先克隆这些候选基因，并构建载体，通过酵母双杂交的方法验证mpl1与候选的蛋白互作筛选。
4. 研究创新点
10项目特色与创新项目由rna-seq的数据出发，从数据分析的结果中寻找突破，使得项目完全建立在数据的支持上，实验更具有目的性和可信度。
项目多运用现代生物学方法，干实验和湿实验结合，不仅进行必要和常用的分子生物学实验，而且使用生物信息学作为辅助分析手段。
这使得证据更加充分，也有利于分子生物学实验的进行。
5. 研究计划与进展
11研究计划与预期进展目前，已获得了rna-seq的数据，并完成了分析工作，找出了23个待验证的e3连接酶基因，并已克隆到了其中的15个。
下一步的试验计划如下：2016.12-2017.1 克隆所有基因，并完成酵母双杂交实验。
2017.1-2017.2 完成crispr/cas9敲除载体的构建，转化农杆菌；诱导愈伤组织。
