1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1研究意义 1．1 系统地探究灵芝bzip家族转录因子生物学功能碱性亮氨酸拉链（basic leucine zipper, zip）类转录因子是最古老广泛的真核生物转录因子家族，存在于所有真核生物中。
在系统地研究这些转录因子的特性发现，不同bzip家族成员在功能上既有互补，同时存在差异(kong et al. 2014, tang et al. 2014)。
据报道，茉莉酸甲酯诱导下， bzip家族的转录因子ap1的表达显著上调(ren, li et al. 2013)。
2. 研究的基本内容和问题
4 研究目标在前期成功构建了部分灵芝bzip沉默载体、并筛选出三个灵芝bzip基因的高效沉默转化子的基础上，确定以下研究目标：1. 对灵芝bzip沉默转化子的灵芝酸生物合成水平进行分析，筛选出调控灵芝酸生物合成的bzip家族转录因子。
2. 通过观察测定非生物胁迫下灵芝bzip沉默转化子菌丝生长情况，筛选出参与非生物胁迫应答途径的bzip家族转录因子。
5研究内容5．1探究灵芝bzip基因对灵芝酸生物合成中的调控作用测定已筛选出的灵芝bzip沉默转化子和野生型灵芝菌株及空载菌株的三萜含量，分析其灵芝酸合成水平的差异，确认该bzip基因对灵芝酸合成的调控作用，筛选出调控灵芝酸生物合成的bzip家族转录因子。
3. 研究的方法与方案
7研究方法a. 通过香草醛-冰乙酸-高氯酸显色法，测定灵芝菌丝的三萜含量。
b. 通过脂质体转化，将沉默载体转入灵芝原生质体。
c. 通过qpcr技术，验证沉默转化子基因表达效率 。
4. 研究创新点
11创新之处bZIP型转录因子在植物中的相关研究较多，但是在真菌中，对bZIP型转录因子的研究较少，本实验研究bZIP型转录因子对担子菌灵芝菌丝生长和代谢产物的调控，进而解析bZIP家族转录因子调控灵芝酸生物合成的机制和在逆境环境对灵芝生长发育的影响。
5. 研究计划与进展
12研究计划及预期进展12．1研究计划2016年9月-2017年1月：分析已筛选出的沉默菌株的灵芝酸生物合成变化，确定影响灵芝酸生物合成水平的候选基因；2017年1月-2017年3月：在已经构建出的灵芝bzip沉默载体的基础上，通过脂质体转化和qpcr技术，继续筛选高效的灵芝bzip转录因子沉默转化子；2017年1月-2017年3月：观察测定热胁迫和氧化胁迫下灵芝bzip沉默转化子菌丝生长情况，筛选出参与热胁迫和氧化胁迫应答的bzip家族转录因子。
2017年5月：项目总结，准备结题材料。
12．2预期进展1. 系统性分析灵芝中所有的bzip家族转录因子，并解析该家族成员的表达特性；2. 筛选出能够调控灵芝酸生物合成的bzip家族转录因子，解析调控机制。
