镉胁迫下一年生黑麦草植物螯合肽及其相关基因的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题研究意义1.1 国内镉污染概况镉 (cadmium, cd ) 是自然界广泛存在的一种重金属微量元素，也是土壤受污染最普遍的重金属之一。

土壤是植物生存的基本介质，对大多数植物而言，土壤中过量的镉极易被植物吸收，并转运到植物的其他组织，亦在可食部位积累，通过食物链给动物和人体带来潜在的危害，严重时可导致疾病发生 [1,2]。

2014年国务院发布了全国土壤污染状况调查公报，结果显示镉、汞、砷、铜、铅、铬、锌、镍 8 种无机污染物点位超标率，且镉的超标率最严重，为 7.0%，镉已经成为农田土壤的主要无机污染物[3]。

2. 研究的基本内容和问题

主要研究目标是对于植物螯合肽及其相关基因在镉胁迫后的6h、12h、24h、96h的表达量比较，以及分析与镉胁迫的相关性。

在bso、gsh的影响下植株镉胁迫下自身植物螯合肽的表达量。

研究的关键问题是一年生黑麦草植物螯合肽的基因组并未测序，如何利用禾本科的其他模式植物找到一年生黑麦草相似性高的植物螯合肽的保守序列以及利用pcr手段将植物螯合肽的cdna序列找到并且利用rt pcr对于该序列进行定量的测定。

3. 研究的方法与方案

rna提取方法1. 样品处理(1) 组织：50-100mg组织中加入1ml trozol试剂。

(2) 单层细胞：加入trozol试剂1ml/cm2平板。

(3) 悬浮细胞：处理前洗涤细胞，以防止rna降解。

4. 研究创新点

首次对于一年生黑麦草的植物螯合肽相关基因进行研究，之前大多数研究关于PCS的基因也大多是在玉米中或者水稻中，对于一年生黑麦草的PCS基因研究还比较少

5. 研究计划与进展

现阶段已经进行一年生黑麦草镉处理下不同时间段的RNA表达量的分析，已经对RNA样品反转录留存，亟待解决的则是对于同源物种进行保守序列的引物设计，目前正在引物设计的尝试阶段，预期在明年三月之前可以将引物得出，四月可以定量分析RNA样品中植物螯合肽相关基因表达的增减强弱。