柳树疮痂病菌遗传转化体系建立开题报告

1. 研究目的与意义

柳树树形优美，放叶、开花早，早春满树嫩绿，是北温带公园中主要树种之一，可培育成各种形状灌丛或作绿篱。园林景观中的水边绿化以柳树最宜，常用于园林观赏，对空气污染及尘埃的抵抗力强，适合于都市庭园中生长。柳树疮痂病菌是本实验室新分离报道的真菌，该病菌能够在柳树叶片上导致疮痂病斑，发病时会导致大量落叶、枯梢,影响柳树的外观，造成严重的经济损失。最近我们对该病菌的基因组进行了测序，发现了多个次生代谢物基因簇，可能与该病原菌的致病性相关。因此需要建立该菌的遗传转化体系，服务于将来的基因敲除工作。

2. 国内外研究现状分析

目前国内外对于疮痂菌的研究主要集中在发生危害、品种抗性评价、流行规律和防治措施等领域，例如花生疮痂病菌、柑橘疮痂菌的种类、变异以及防治；芒果疮痂菌、番茄疮痂菌等多种疮痂菌的生物学研究。但关于柳树疮痂病菌的研究并不多见。另外，农杆菌介导的遗传转化体系也应用到了疮痂菌的研究中，具有受体形式多样、转化效率高等优势。

3. 研究的基本内容与计划

在本研究中，我们尝试建立柳树疮痂菌的农杆菌介导遗传转化体系，采集最适抗生素浓度、共培养时间、阳性克隆数目等数据，分析不同条件下遗传转化的效率，获得高效的遗传转化体系，并通过分子检测验证。筛选柳树疮痂菌的最适转化条件，转化报告基因，比较不同条件下的转化效率，以此为将来定点敲除其次生代谢基因创造条件。

4. 研究创新点

采集最适抗生素浓度、共培养时间、阳性克隆数目等数据，分析不同条件下遗传转化的效率，获得高效的遗传转化体系，并通过分子检测验证。筛选柳树疮痂菌的最适转化条件，转化报告基因，比较不同条件下的转化效率。