一株粘质沙雷氏菌Sm1的抑菌机理初探开题报告

 2021-08-08 19:45:59

1. 研究目的与意义

本实验主要是对粘质沙雷氏菌抑菌原理的探寻,也对一些促进植物生长的物质进行了解,如IAA、2,3-丁二醇等。

当了解这些机制后,可以对我们的生产实践进行指导,能有效应对生物防治问题,提高作物产量品质等。

2. 国内外研究现状分析

1905年Benecke首次分离了可利用几丁质作为营养物质的微生物并定名为Bacillus chitinovors。这是首次有关产几丁质酶的微生物的报道。1921年Folpmers首次发现分解几丁质的细菌和放线菌在含有几丁质的琼脂上形成透明圈,证明了培养物中含有水溶性的几丁质酶的存在。1929年Karrer和Hofman用蜗牛肠道酶使几丁质转化成N-乙酰氨基葡萄糖,间接地表明几丁质的组成成分。1931年Grassmann和Rubenbauer发现Aspergillus的提取物能把几丁质水解成碘可以检测到的还原性物质。1938年Zobell和Ritten Berg研究了海水中能够分解几丁质酶的细菌,从而推测几丁质的分解是由于糖苷键的断裂或氨基酸基团的脱落造成的。1951年Jeuniaux从土壤中分离的放线菌胞外分泌物中分离到了几丁质酶。

粘质沙雷氏菌能够抑菌的重要原因是它是一种可以产生几丁质酶的菌株。在1986年,Jone等就克隆到了粘质沙雷氏菌的Chi A 和 Chi B基因,并测定了全序列。1999年,Tanaka等从湿热古细菌Thermococcus kodakaraensis KOD1中克隆到了几丁质酶基因Chi A。但是国内对微生物几丁质酶学的研究比较晚,2003 年,张表等构建了含有Chi A基因的克隆载体,并完成测序和序列分析。根据孟利强等人的研究,粘质沙雷氏菌具有较强的几丁质酶活性,通过实验设计引物,克隆到目的基因Chi A,并对其几丁质酶蛋白质结构进行生物信息学分析,可以为了解微生物几丁质酶系及构建高产几丁质酶工程菌提供参考。

3. 研究的基本内容与计划

1.对粘质沙雷氏菌的抗菌物质进行分析

(1)采用蛋白酶溶解圈、几丁质平板法等 了解其产蛋白酶、几丁质酶的情况。

(2)采用tlc、hplc等方法对硝吡咯菌素进行检测

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4. 研究创新点

本实验主要采用一些平板对峙实验进行抑菌分析,并对抑菌植物采用平板溶解圈来判断产生物质情况,以及采用蛋白酶溶解圈、几丁质平板法等了解其产蛋白酶、几丁质酶的情况。

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