1. 研究目的与意义
青梅含有柠檬酸等多种天然有机酸,碱性矿物质,和黄酮等。具有抑菌,改善胃肠道功能,防治痛风和结石等功效。有研究报道青梅酚类和黄酮类化合物对小鼠关节周围肿胀组织中NO、IL-6、IL-8、TNF-α、等炎症因子和细胞因子有明显抑制作用。长期饮用青梅汁可降低血糖和血脂含量。同时研究表明肥胖也是一种长期低度的炎症反应。 因此我们推测青梅浓缩汁中的有效成分对脂肪代谢有一定的调节作用,本项目通过检测青梅浓缩汁对小鼠脂肪细胞3T3-L1细胞的增殖、分化,脂肪降解等方面的作用,研究青梅浓缩汁对3T3-L1脂肪细胞的脂肪代谢调控机理。
2. 国内外研究现状分析
对2型糖尿病大鼠进行乌梅复方治疗,乌梅复方寒性中药治疗,乌梅配方温性中药治疗,使大鼠的口服葡萄糖耐量试验、胰岛素释放试验和胰岛素抵抗指数的水平均降低,此外使肝脏、骨骼肌和脂肪组织的胰岛素受体、irs-1、glut-4的蛋白质和mrna的表达水平明显增多,在肝和骨骼肌组织中β-arrestin-2的mrna的表达水平也明显升高。表明乌梅配方及其拆方提取物能有效改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗。
在肥胖小鼠中,青梅果实70%乙醇提取物(ems)显著减少体重、肝脏和脂肪组织重量的增加,而不影响食物的摄入量,从而显示出抗肥胖的作用。同时,ems具有改善糖尿病患者空腹血糖和糖耐量异常的抗糖尿病作用。因此,ems可以用来预防糖尿病而不造成像格列酮类药物造成脂肪积累的副作用,尽管他们都靶向ppar-γ。
青梅(pam)和紫草提取物(les)处理的去卵巢(ovx)大鼠通过降低每日食物摄入量,增加能量消耗和脂肪氧化,防止了体重增加和内脏脂肪堆积。pam les处理通过增加ovx大鼠下丘脑瘦素受体的表达抑制了瘦素和胰岛素信号的衰减。pma les能通过增加在棕色脂肪组织中ucp-1的表达与股四头肌中ucp-2和ucp-3 的表达显著逆转ovx大鼠的能量消耗减少。pma les也增加在肝脏、股四头肌肌肉的cpt-1的表达和减少fas、acc、和srebp-1c表达导致降低甘油三酯的积累。pma les改善去卵巢大鼠胰岛素敏感性。总之,pma les通过增强ovx大鼠下丘脑瘦素和胰岛素信号协同防止能量、脂肪和葡萄糖代谢的损伤。
3. 研究的基本内容与计划
用不同浓度的青梅浓缩汁对3T3-L1前脂肪细胞进行给药处理,以MTT法观察细胞增殖情况;以油红O染色和甘油三酯试剂盒检测青梅浓缩汁对脂肪生成的影响,收集不同浓度青梅浓缩汁处理后的细胞,提取RNA,并逆转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR的方法检测处理过的细胞中调控脂肪生成的关键转录因子或标记蛋白的mRNA水平。 三、实验数据采集与处理 检测分析要求至少重复3次,对实验数据进行统计分析(利用Excel统计软件),数据用平均值表示,STDEV是标准偏差,两组数据问的比较使用t检验。显著性水平设为p≤0.05。
4. 研究创新点
国内外已有的相关实验大多是对动物个体进行处理的生理代谢实验,做的主要是青梅提取物对激素调控的影响进而影响脂肪累积,本课题做的是细胞实验,查看青梅提取物对脂肪细胞的直接作用效果。
