地栽百合成熟叶片总RNA提取方法的选择优化开题报告

1. 研究目的与意义

对于百合总RNA的提取方法研究已有相关文献报道，但大多集中在百合花蕾和组培苗叶片，对成熟百合叶片总RNA的提取尚无相关报道。

本研究选取地栽东方百合索邦和法兰西的成熟叶片为材料，比较了四种传统方法提取总RNA的效果，并对提取较差的方法进行改进，以其为成熟百合叶片提取总RNA找到适宜的方法，以便进行更广泛的分子生物学研究。

2. 国内外研究现状分析

在百合总RNA提取方法的研究方面，研究人员已经取得了一些进展。如异硫氰酸胍法（Cham ezyn sk I Sacchi 1987）SDS酚抽提法（夏兰芹 和郭 三 堆， 2000）苯酚法和氯化锂法（王关林和方宏筠，1998），还有应用商品化的Trizol试剂盒等。因为次生代谢物对RNA的提取影响很大，因此从百合中提取搞质量的RNA有相当的难度（李宏和王新力，1999）。另外，多糖还会抑制许多酶的活性（Fang et al.,1992）,所以一直以来提取的百合总RNA质量不高。但为了阐明百合发育基因的表达与调控机制，必须提取搞质量的RNA。之后研究出了CTAB改进法（Kiefer et al.,2000）和SDS改进法（Zhou et al.,1999）。以期找到一种适于百合RNA提取的最优方法。

3. 研究的基本内容与计划

内容：比较了四种传统方法提取总rna的效果，并对提取较差的方法进行改进，以其为成熟百合叶片提取总rna找到适宜的方法。

计划：2012年2月25日～3月7日，阅读文献，撰写开题报告；

2012年3月8日～4月28日，进行实验；

4. 研究创新点

1. 将传统的提取RNA的CTAB法和SDS法进行了改进和优化