1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）1.意义流式细胞术( flow cytometry，fcm) 是利用流式细胞仪对生物颗粒( 细胞、细胞器、微生物) 的多种物理和生物学特性进行定量分析，并根据测量的参数，将测量群体中的一个或两个亚群加以分选的细胞分析测量技术。
目前，fcm 在临床医学和基础医学研究领域的应用较为广泛，但在植物学研究领域中，是由于植物组织与细胞结构复杂，适合流式细胞分析的植物单细胞悬液制备比较困难，使流式细胞术在植物科学中的应用滞后于其他学科。
染色体倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的作用。
2. 研究的基本内容和问题
1.目的优化利用流式细胞仪快速鉴定水稻倍性的方法，提高倍性鉴定的成功率和准确度。
2.实验内容（1）实验材料的选择选取幼嫩的新鲜叶片水稻，分别-20℃冻存不同时间（2天、10天、一个月）及液氮保存，使用解离液提取各个样本的细胞核悬液，检测细胞核的完整率，比较不同保存条件对细胞核悬液提取质量的影响，给植物材料的保存提供依据；选取水稻叶片、茎节、根尖等组织，提取细胞核悬液，检测细胞核的完整率，比较不同部位的材料对细胞混悬液提取质量的影响。
（2）解离液的选择因不同配方的解离液对植物核悬液的提取影响巨大，本研究利用本校常用的植物种类水稻，试验常用的六种核悬液提取配方（galbraith法、lb01法、wpb法、otto法、gpb法、tris/mgcl2），比较出对水稻解离效果最好的解离液。
3. 研究的方法与方案
1.方法1）提取液配制galbraith法、lb01法、wpb法、otto法、gpb法、tris/mgcl22）细胞核悬液的制备取2周龄的水稻苗嫩叶(约20～ 50 mg),置于塑料培养皿中加入1 ml冰冷的缓冲液。
并使用锋利剃须刀片切碎,先用 70μm 过滤器过滤，再用 40μm 过滤器过滤，低速1000r离心5min,加入dna荧光染料碘化丙锭(pi,propidium iodide,终浓度为50μg/ml)及rnase(终浓度为50μg/ml)。
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4. 研究创新点
目前国内外关于细胞核纯化的方法鲜有报道，有望找到不同材料细胞核悬液的纯化的统一方案。
5. 研究计划与进展
2017.07-2017.08 查看文献，熟悉实验内容2017.08-2017.12 熟练掌握实验步骤2018.03-2017.04实验材料的培养；实验材料不同组织部位细胞核悬液提取的效果；保存条件对细胞核悬液提取的影响。
2018.04-2018.05水稻合适的解离液的选择实验；细胞核纯化方法探索2018.05-2018.06流式细胞仪参数的优化，同时进行实验总结和补充，撰写结题报告和研究论文。
