灵芝内源多胺合成关键调控蛋白的克隆及表达特性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义：通过原核载体的构建将鸟氨酸脱羧酶抗酶的基因诱导到大肠杆菌中进行表达，可以深入研究鸟氨酸脱羧酶抗酶的基因功能及其相关应用，具有很大的创新价值。

为更好的研究鸟氨酸脱羧酶抗酶提供了科学基础。

与此同时，该试验也为研究鸟氨酸脱羧酶抗酶的调控机制丰富了理论依据，对该科研领域起到了非常重要的理论意义。

2. 研究的基本内容和问题

1. 研究目标构建原核表达载体与目的基因复合体，导入大肠杆菌，利用大肠杆菌表达的蛋白研究其表达特性。

2．研究内容2.1 原核表达载体的构建2.2 载体导入大肠杆菌2.3 探究其蛋白表达特性

3. 研究的方法与方案

1．研究方法（1）基因克隆：pcr技术，感受态制备，转化。

iptg蛋白小量诱导2．技术路线目的基因>设计引物>pcr扩增目的片段>跑胶>胶回收>目的片段连接t载体>测序>提质粒>酶切目的片段>目的片段连接pet-32a原核表达载体> iptg小量诱导蛋白可行性分析在本实验室（真菌实验室）灵芝研究领域中已经拥有了很多的经验，实验技术和方法都很成熟。

实验室已经成功掌握了基因的原核载体构建和基因诱导等技术，这些相关操作手段为下一步研究基因的功能提供了研究基础和前提。

4. 研究创新点

本项目的创新之处本实验首次异源表达灵芝鸟氨酸脱羧酶抗酶

5. 研究计划与进展

1.研究计划按照预期进行2. 预期进展1) 成功构建原核表达载体2) 成功将载体导入到大肠杆菌中，得到表达蛋白。