灵芝在应对不同环境刺激下外源性硫化氢的调控作用开题报告

 2022-01-23 20:51:59

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.内源性硫化氢研究的意义

人类对硫化氢(hs )的研究已有近300年历史,但过去的研究主要集中于其毒理方面。然而,1989年goodw in等在鼠、牛及人的大脑中发现有相对较高浓度的内源性hs,提示了hs可能有较重要的生理作用。1996年,abe等首次通过实验证明人体内源性hs可能是一种神经活性物质。近年来大量的研究表明内源性hs在神经系统、消化系统、心血管系统、呼吸系统等均有重要的生理作用,并参与了一些疾病的病理生理过程,被认为是继一氧化氮(no)和一氧化碳(co)之后的第三类气体信号分子。单独或同no, co一起调节体内一系列生理过程,同时在神经变性疾病、糖尿病、心力衰竭、炎症、再灌注损伤、微循环应激、癌症等疾病发病机理中扮演着重要角色,但目前对其生理作用的理解远低于no和co。我们应该加大对内源性硫化氢对生物调控作用的研究投入[1]

1.1内源性硫化氢的来源

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2. 研究的基本内容和问题

2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题

2.1 研究的目标

研究内源性硫化氢对处于逆境中的灵芝菌种的调控作用,有可能缓解逆境的胁迫作用,有可能是加重逆境的胁迫作用,也有可能与逆境的胁迫调控无关。

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3. 研究的方法与方案


3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

此次实验的主要研究对象是灵芝,灵芝中最主要的有效成分是灵芝多糖和三萜类化合物,测定野生型菌株中灵芝多糖和三萜类化合物的含量,然后将野生型菌株分别处于不同的胁迫环境下,如水杨酸环境,高温环境,过氧化环境,碳,氮饥饿环境等培养,测定灵芝多糖和三萜类化合物的含量,然后添加NaHS促进内源性硫化氢合成,培养一段时间后再次测定灵芝多糖和三萜类化合物的含量,进行对比可以研究内源性硫化氢对灵芝在逆境中的调控作用。

3.1 NaHS对野生型灵芝菌株的影响

200uMolNaHS

a b c三个平行实验

100uMolNaHS

a b c三个平行实验

20uMolNaHS

a b c三个平行实验

10uMolNaHS

a b c三个平行实验

对照组CK

a b c三个平行实验

通过这5个不同浓度NaHS的处理来研究不同浓度的硫化氢对灵芝的生长影响,确定其致死浓度范围。

3.2 NaHS对热激胁迫的调控作用

200uMolNaHS

a b c三个平行实验

42℃培养

200uMolNaHS

a b c三个平行实验

28℃培养

100uMolNaHS

a b c三个平行实验

42℃培养

100uMolNaHS

a b c三个平行实验

28℃培养

20uMolNaHS

a b c三个平行实验

42℃培养

20uMolNaHS

a b c三个平行实验

28℃培养

10uMolNaHS

a b c三个平行实验

42℃培养

10uMolNaHS

a b c三个平行实验

28℃培养

对照组 CK

a b c三个平行实验

42℃培养

对照组 CK

a b c三个平行实验

28℃培养

3.3其他胁迫的实验设计与热激胁迫类似。

4. 研究创新点

每个处理都使用三个平行实验,提高实验的可信度。

5. 研究计划与进展

4.研究计划及预期进展

1.

1.11.15 研究内源性hs供体硫氢化钠(nahs)的浓度对野生型菌株的影响,绘制其影响曲线,确定致死浓度的范围。

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