1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
甲烷是天然气的主要成分、是第二大温室气体。
嗜好甲烷菌能以甲烷为唯一碳源和能源生长，在能源、化工和环境等方面被寄予厚望。
近年来，随着石油价格攀升、天然气产量增加，嗜甲烷菌的研究逐渐升温。
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2. 研究的基本内容和问题
目标：建立成熟的嗜甲烷菌研究平台；鉴定pmmo操纵子的启动子区域，阐明调控pmmo操纵子转录的关键顺式和反式作用元件。
内容以mmog和mmor为研究基因，拟采取fusion pcr的方法获得基因左右两端的同源臂和zeo抗性基因的连接产物，随后通过电转化的方式将所获得的pcr片段导入至甲烷氧化菌5gb1菌体中，采用zeor抗性的方法获得同源重组转化子。
从而研究被敲除基因对5gb1甲烷氧化菌甲烷氧化酶表达的影响。
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3. 研究的方法与方案
研究方法：dna分子提取及纯化，pcr目的片段扩展，融合pcr，电转化。
技术路线：研究平台的建立；pmmo启动子区域和调控区域的鉴定；调控蛋白的纯化、基因的鉴定。
实验方案是先筛出优良菌株，再进行dna的提取，再借助实验室的多种手段去研究敲除基因。
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4. 研究创新点
借助最新发现和开发的优良研究材料与高效研究方法，首次揭示MB中铜离子诱导pMMO表达过程中的关键调控因子及其作用位点，为进一步阐明完整的铜离子信号通路以及MB的生产应用打下基础。
5. 研究计划与进展
2015 年10 月-2015 年12 月：（1）研究平台的建立；（2）pMMO启动子区域和调控区域的鉴定；2016 年1 月-2016 年2 月：（1）调控蛋白的分离、纯化；（2）目标基因的预测、敲除与互补；2016 年3 月-2016 年4 月：（1）铜离子对sMMO和pMMO的表达影响（2）荧光定量PCR分析2016 年5 月（1）写论文以及答辩
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