1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1 本课题的意义
由于人类日常的生产和生活活动引起的水体富营养化已成为当今大多数地表水体所面临的主要问题,水体富营养化对淡水和沿岸海水的生态系统产生了很多负面的影响[1]。近年来,特别是2007年太湖蓝藻水华引起的饮用水危机[2]以来,蓝藻水华一直备受各级管理部门和社会各界关注。这一重要生态学领域在不断取得新成果,不断加深人们对蓝藻水华的科学认识并作为理论基础支撑蓝藻水华的防治。在我国,随着各地经济的高速发展,富营养化问题也日渐严重,太湖水域更是不断爆发蓝藻水华,不仅使水体的水质下降,严重危害人体健康,而且成为了制约我国社会经济可持续发展的重要因素。
孔繁翔和高光[3]分析了导致蓝藻水华形成的物理,化学和生物等主要环境因素,论述了蓝藻,尤其是微囊藻属(microcystis)成为水华优势种的可能原因。科学研究表明,茶叶提取物中含有一些化感物质,可以高效而持续的抑制藻类的生长。表没食子儿茶素没食子酸(egcg),是茶叶中组分最高的一种儿茶素,对铜绿微囊藻具有高效而持续的抑制作用[4]。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
通过藻起始浓度、抑藻剂浓度、处理时间、细胞破碎、蛋白提取及双向电泳条件等方面因素的试验与优化,建立铜绿微囊藻蛋白质组的双向电泳方法,得到高重复性、高分辨率的双向电泳图谱,并分析抑藻剂处理前后蛋白质表达谱的变化。
2 研究内容
3. 研究的方法与方案
1 研究方法
1.1 运用流式细胞仪测定藻细胞数目,计算抑藻率。
1.3使用研磨,超声,冻融,冻融加研磨等方法,优化细胞破碎方法。
4. 研究创新点
针对藻蓝蛋白含量很高,且含有大量不易溶解的膜蛋白的铜绿微囊藻蛋白质组,建立蛋白分析方法。
5. 研究计划与进展
1研究计划
2015.9 查阅资料,了解与本实验相关的研究在国内外进展的情况,整理实验思路,准备实验器材。
2015.10-2015.12 初步探究铜绿微囊藻的培养方法、寻找适合的藻初始浓度以及处理时间,处理浓度,熟悉蛋白质提取和保存的各个步骤,熟悉双向电泳的步骤。
