短短芽孢杆菌的分离鉴定和转化开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

意义：利用bacillusbrevis可以有效而简便的生产重组蛋白质。它具有以下几个优点：宿主安全；可以分泌各种具有正确折叠的蛋白质；系统中不存在蛋白酶，蛋白产物不会被分解；生产过程简便，只需要发酵；各种培养基的存在，消除了细胞分裂和蛋白质重折叠，使我们得到高效的纯化产品。

国内外研究概况：现今多用e.coli生产重组蛋白，效率较低，bacillusbrevis的研究尚在起步阶段。

应用前景：该系统可以高效简便的生产重组蛋白质，对农业方面减少生产成本提高生产效率具有重要作用。在农业系统会有广泛的应用。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：分离筛选鉴定出多株短短芽孢杆菌，然后摸索不同条件进行转化

研究内容：从不同生境采集土样，热处理获得芽孢杆菌，稀释涂布，菌落pcr扩增短短芽胞杆菌特异性的cwp基因，测序验证所扩基因的正确性，进一步通过16srrna基因序列鉴定为短短芽孢杆菌属，拟筛选获得多株短短芽孢杆菌。并摸索出化学转化和电极转化的套路来进行转化。

解决的关键问题：转化短短芽孢杆菌方法的摸索

3. 研究的方法与方案

研究方法：pcr，基因重组技术，凝胶纯化

技术路线

1.土样的采集

4. 研究创新点

短短芽孢杆菌虽然作为表达宿主具有各种优点，但是其转化困难一直牵制着它的应用，虽然Takara公司已经开发出商品化的可用于转化的短短芽胞杆菌，但其成本较高。本实验拟在不同生境筛选出各种短短芽孢杆菌，通过摸索其转化方法，筛选出更适合转化的短短芽孢杆菌和一套优化了的转化方案，进而降低成本，扩大短短芽胞杆菌在工业、农业中的应用范围。

5. 研究计划与进展

预计于2015年4月可基本结束实验部分，之后时间进行实验数据的整理与分析，和毕业论文的撰写。本实验计划于2014年1月至2015年4月间完成，实验若进展顺利预计可提前结束。