沙雷氏菌胞外蛋白酶的基因突变对灵菌红素合成的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

灵菌红素族色素(prodiginines)是一类含有三吡咯结构的天然红色素家族的总称，包括prodigiosin、undecylprodigiosin、butyl-meta-cycloheptylprodigiosin等[1]。

灵菌红素及其衍生物作为一类典型的次生代谢产物，其产生菌主要有粘质沙雷氏菌(serratia marcescens)、假单胞菌(pseudomonas)、链霉菌(streptomyces)等。

灵菌红素及其衍生物具有多种生物活性，如抗菌，抗真菌，抗原虫，抗疟，免疫抑制和抗癌活性[2-3]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：前期研究发现，胞外蛋白酶基因缺失突变株的颜色与野生型沙雷氏菌的颜色不同。

本选题将对蛋白酶基因的缺失突变株在不同培养基中合成灵菌红素的产量进行测定，从而初步了解该蛋白酶是通过什么途径调节灵菌红素的合成的。

研究内容：1.野生型和突变型沙雷氏菌生长曲线的测定；2.野生型和突变型沙雷氏菌所产灵菌红素的提取和测定比较。

3. 研究的方法与方案

研究方法：1.使用酸性乙醇提取灵菌红素；2.运用分光光度法测定菌体量和灵菌红素产量。

技术路线：实验方案：1.保藏菌种经活化后接入20ml种子液（lb培养基）培养24h，再以2%的接种量接入100ml发酵培养基培养。

2.菌体量的测定：每隔2h取发酵液2ml测od600，制作生长曲线。

4. 研究创新点

目前灵菌红素的产量研究主要集中在对培养基成分和培养条件的优化上面。

本选题通过研究沙雷氏菌胞外对灵菌红素合成的调节途径，提供运用分子改造获得高产菌株的新思路。

5. 研究计划与进展

2015.01-2015.01相关资料的查阅与收集。

2015.01-2015.04进行实验。

2015.04-2015.05整理实验数据，撰写论文。