PlyA基因参与粘细菌Myxococcus xanthus发育机制的研究开题报告

 2022-01-29 18:44:58

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

粘细菌作为一类具有代表性意义的细菌类群,具有独特的社会性行为和发育进程,粘细菌发育过程中的具体机制已成为研究的热点,其中是细胞胞外多糖对于粘细菌发育的影响的研究也是越来越多,本研究得到一个参与粘细菌胞外多糖合成的基因,通过基因操作研究该基因对粘细菌发育的影响,研究胞外多糖对于粘细菌发育的意义,为了解发育学意义提供基础数据 。

粘细菌虽然在1809年就已经被发现,但是由于当时技术条件不足,知道19世纪60、70年代人们才开始大量研究。

在过去的30年里,粘细菌细胞行为的研究主要是以黄色粘球菌(myxococcus xanthus)作为模式材料开展的。

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2. 研究的基本内容和问题

本研究以插入失活为手段构建plya缺陷菌株,目的是为了阐明该基因以及胞外多糖参与粘细菌发育过程中的作用。

实验以模式菌株myxococcus xanthus dk1622为材料,结合实验室得到的基因plya,以pcr手段扩增同源片段构建pbj113-plya重组质粒。

经过电转化将重组质粒转入dk1622。

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3. 研究的方法与方案

本实验结合生物信息学分析、定点突变菌株性状对plya的调控功能进行了综合分折。

构建了plya插入失活菌株,通过对该菌株多糖合成、多细胞运动以及子实体形成缺陷进行研究,阐述了其参与myxococcus xanthus的发育分子机制。

实验首先以pcr手段扩增已得到的plya基因同源片段,经纯化测序后,选择完全正确的产物,双酶切构建pbj113-plya重组质粒。

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4. 研究创新点

就是对于粘细菌发育学国内研究较少,本实验提供的该基因目前国内外没有对其进行研究,对于了解其具体参入粘细菌发育进程的机制具有创新意义。

5. 研究计划与进展

2014.05-2013.06文献查阅,课题方案制定2014.06-2014.10重组质粒构建及筛选2014.10-2014.12缺陷菌株构建及筛选2014.12-2015.03子实体发育和生孢能力分析2015.03-2015.05论文撰写及提交结题报告

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