蛋白质精氨酸甲基转移酶X在小鼠肺发育中的作用——肺组织条件性基因敲除小鼠的获得开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、蛋白质甲基化

蛋白质翻译后修饰是指在mrna被翻译成蛋白质后，对蛋白质上个别氨基酸残基进行共价修饰的过程，它使蛋白质的结构更为复杂，更为完善，调节更为精细，作用更为专一。常见的蛋白质翻译后修饰过程有泛素化、磷酸化、糖基化、脂基化、甲基化和乙酰化等，其在生命体中具有十分重要的作用。

蛋白质的甲基化修饰是在甲级转移酶催化下，在赖氨酸或精氨酸侧链氨基上进行的甲基化。另外也有对天冬氨酸或谷氨酸侧链羧基进行甲基化形成甲酯的形式。甲基化增加了立体阻力，并且渠道了氨基的氢，影响了氢键的形成。因此甲基化可以调控分子间和分子与目标蛋白的相互作用。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标：得到条件性敲除的小鼠模型

2、研究内容：通过cre、flp工具小鼠交配，获得胚胎不同天数的prmt5在肺泡二型细胞中条件性敲除的小鼠材料，并观察组织切片表型变化

3、拟解决的关键问题：prmt5基因敲除的纯合小鼠在受精卵时期致死，所以利用cre-loxp系统和teton系统在胚胎时期以药物诱导的方式可以获得在特异靶细胞基因敲除的小鼠，从而解决了实验材料的问题

3. 研究的方法与方案

1、研究方法：

1、1小鼠饲养管理及dna提取

1、1、1小鼠饲养及管理

4. 研究创新点

利用TetOn系统的工具小鼠交配获得的小鼠模型，可以特异性地针对不同时期不同靶细胞进行目的基因的敲除，因此得到的小鼠材料对研究一些可能造成胚胎致死的基因具有非常重要的意义吗，也是本实验的创新之处

5. 研究计划与进展

2月至3月底 利用pcr技术鉴定工具小鼠，训练pcr操作技术

3月至4月 条件性敲除小鼠药物处理和获得目标小鼠模型

4月至5月 获得目标小鼠胚胎材料、观察表型和蛋白表达水平