四氢嘧啶高产菌种的分离筛选与菌种鉴定开题报告

 2022-02-07 17:09:26

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1、研究的目的与意义四氢嘧啶(1,4,5,6-四氢-2-甲基-4-嘧啶羧酸)是中度嗜盐菌主要的渗透压补偿性溶质。

研究发现,四氢嘧啶不仅可以作为渗透压补偿性溶质,保护细菌细胞在高渗环境中生长,而且可以对处于高温、冷冻、射线等极端环境中细菌细胞的蛋白质、酶、核酸等起到保护作用[1]。

基于四氢嘧啶的这些保护作用,我们可将其运用在化妆品、生物制剂、酶制剂等工业领域中,这对我们的生产生活有着极其重要的意义。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标:通过对高产四氢嘧啶菌株的分离,筛选与鉴定,找出最适的发酵条件,为以后的工业应用打下基础。

内容:(1)采集盐碱土样,加入到高盐培养基中富集,分离,纯化。

(2)筛选出能够在较高盐浓度条件生长菌株,通过液相色谱法检测四氢嘧啶产量,从而筛选出四氢嘧啶合成量较高的菌株。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:(1) 菌株的富集,分离与纯化称取盐碱土样3g,加入到100ml培养基中(培养基配方:葡萄糖5g/l,谷氨酸和天冬氨酸各0.8g/l,mgso47h2o 0.25g/l,k2hpo4 0.2g/l (nh4)2so4 0.5g/l,cacl2 0.02g/l,nacl 100g/l),置于30℃,170r/min摇床培养,定期观察菌体生长情况。

5d后将富集液经行梯度稀释并涂布于固体培养基平板,30℃培养7d,从平板上挑取单菌落划线纯化后,将纯化的菌株再次接种至新鲜培养基斜面,置于4℃冰箱保存备用。

(2)菌株的四氢嘧啶产量的测定 采用液相色谱法测定。

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4. 研究创新点

本课题的特色与创新之处是分离到一株四氢嘧啶合成量相对较高中度嗜盐菌,并得到最适发酵条件,并采用细菌挤奶工艺,提取四氢嘧啶。

5. 研究计划与进展

2014.10-2015.1 分离筛选鉴定高产四氢嘧啶菌株2015.2-2015.3 研究该菌株最适发酵条件,建立细菌挤奶工艺2015.4整理数据,撰写论文

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