1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
当今,重金属胁迫已经成为一个影响粮食生产的重要不利因素。
有关重金属污染对植物的伤害研究已有不少的报道,但往往局限于重金属浓度变化等表面效应研究,有关的生态过程及其微观机理并不很清楚。
随着研究方法和分析技术的不断完善,重金属胁迫下植物的抗性机制获得重要突破。
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2. 研究的基本内容和问题
本课题拟解决以下几个主要问题:1、提取玉米木质部中的microrna2、设计出相关可能存在的并且感兴趣的microrna的引物。
3、通过实时定量pcr和高通量测序两种方法做镉(cd2 )胁迫下的microrna的表达分析。
4、通过生物信息学的方法,找出可能与之互作的相关转录因子等。
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3. 研究的方法与方案
1、主要技术流程:首先收集玉米的木质部汁液,然后采取传统的rna提取方法提取其中的总rna,接着将获得的rna一部分用于高通量测序,另一部分则通过反转录得到用以做定量pcr的模板。
2、可行性分析:在技术上,本实验室已有较为成熟的玉米培养和rna提取方法,得到的microrna也有专门的反转录和定量试剂盒用以作定量分析。
此外本实验室的设备比较齐全,资金比较充足,能够满足课题的开展。
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4. 研究创新点
目前,大家对重金属胁迫和MicroRNA的研究较为独立,而将二者结合在一起的研究报告还较少。
本工作结合近来比较热的MicroRNA,另辟蹊径探究植物输导组织中可能存在的参与镉(Cd2 )胁迫反应中的MicroRNA的表达情况。
5. 研究计划与进展
2014.10-2014.11 提取出玉米木质部McroRNA2014.11-2015.02 MicroRNA测序及定量分析2015.03-2015.04 结果分析整理,整理毕业论文。
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