水稻锌指蛋白ZFP36的亚细胞定位研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

水分胁迫包括干旱、盐渍等限制植物生长发育、影响作物产量的重要胁迫因子。

水稻是重要的经济作物，其对干旱、高盐等非生物胁迫的适应性对于作物的产量和品质有着非常重要的影响。

水分胁迫下植物的生存取决于它们感知刺激、产生与传递信号、启动各种生理生化变化的能力。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容大量研究发现,锌指蛋白在不同的逆境胁迫下直接参与了对非生物逆境应答的调控。

但是水稻中的锌指蛋白基因在aba诱导的植物的抗氧化防护系统中的作用机理却并不清楚。

在研究蛋白质功能时，常常需要先对蛋白质进行定位，常规研究一般利用强启动子启动来完成对目的蛋白的定位，但是我们无法得知强启动子启动下的oszfp36基因的表达与oszfp36在其自身启动子启动下的情况的是否接近，利用强启动子启动oszfp36表达的研究方法是否可信可行。

3. 研究的方法与方案

研究方法利用基因重组技术，分别构建含35s强启动子的重组表达载体35s:zfp36-yfp、含oszfp36自身启动子的重组表达载体oszfp36: oszfp36-yfp。

再以水稻原生质体瞬时表达分析，借助激光共聚焦显微镜观察对照利用两种不同启动子的表达载体的oszfp36的亚细胞定位。

实验方案（1）在ncbi中查找oszfp36的相关信息。

4. 研究创新点

利用转录因子锌指蛋白OsZFP36的自身启动子对其进行亚细胞定位，并将其与利用强启动子定位进行比较，分析两者之间的差别。

5. 研究计划与进展

2014.07-2014.08 设计Os ZFP36的引物，PCR、连接、转化，提取含有目的基因的质粒，对所提取质粒进行测序。

2014.09 -2014.10 构建重组表达载体35S:ZFP36-YFP与OsZFP36: OsZFP36-YFP，转化水稻原生质体，利用激光共聚焦显微镜观察定位情况。