1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
灵芝[ganoderma lucidum (curtis: fr.) karst ]属担子菌纲、多孔菌科、灵芝属（ganoderma），是我国著名的药用真菌。
灵芝目前已成为研究大型担子真菌的模式物种，以灵芝为开端可以展开对真菌较为系统的研究和利用。
目前，对于大型担子真菌的利用极为广泛，除食用和药用之外，真菌所产生的次生代谢物及胞外酶展现出极大的应用价值。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：通过不同浓度的氮源处理灵芝，测定其产生漆酶的浓度，以研究氮浓度与漆酶的关系，进一步探究氮饥饿影响转录因子Ap1的表达，从而影响漆酶的产生，深入了解氮代谢和产生漆酶的机理。
研究内容：1. 不同浓度的L-天冬氨酸处理下灵芝的生长情况2. 不同浓度的L-天冬氨酸处理检测胞外漆酶活性，研究氮饥饿对漆酶活性的影响3. 构建AP1的沉默转化子并检测漆酶活性，研究AP1在氮代谢影响漆酶活性中发挥的作用拟解决的关键问题：氮饥饿处理影响关键基因表达进而影响漆酶产生的分子机理
3. 研究的方法与方案
研究方法1) 漆酶酶活检测：分别用平板添加abts的方法和收集发酵液测定酶活的方法检测胞外漆酶的活性。
2) 利用rt-pcr检测氮代谢途径中相关基因及漆酶相关基因的表达水平，推测可能的途径和通路技术路线和实验方案实验方案：1.摇床培养液体菌，以不同浓度的l-天冬氨酸作为唯一氮源，测定野生型菌种发酵液的漆酶活性，同时构建ap1的沉默转化子并测定漆酶活性，以显示ap1在氮代谢影响产生漆酶活性的作用。
2.平板培养菌种，以不同浓度的l-天冬氨酸作为唯一氮源，平板显色测定漆酶活性，同时构建ap1的沉默转化子并测定漆酶活性。
4. 研究创新点
本实验比较系统地研究了氮饥饿对白腐真菌灵芝的生长情况的影响，并重点关注了氮饥饿处理对灵芝产生漆酶的影响，进一步探究漆酶相关基因表达的途径和通路。
5. 研究计划与进展
实验计划1) 2014.09-2014.10 查阅资料，整理实验思路，准备实验器材，熟悉相关实验方法2) 2014.11-2015.12 研究不同L-天冬氨酸浓度对灵芝生长及此生代谢物的影响，重点关注对产生漆酶的活性的影响3) 2015.01-2015.02 研究氮代谢影响漆酶产生过程中的相关基因的表达，初步建立代谢途径4) 2015.03-2015.04 处理及分析实验数据，讨论与总结，撰写毕业论文预期进展1.确定氮饥饿对灵芝产生漆酶活性的具体影响2.初步确定氮代谢影响漆酶产生的具体过程和相关基因的表达情况
