1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode，简称epn)是寄生于昆虫并且通过释放线虫消化道内的共生菌杀死昆虫宿主的寄生线虫。
昆虫病原线虫与其共生菌是互利共生的。
昆虫病原线虫的共生菌在土壤中难以存活，单独侵染宿主后无法致病，并且在繁殖过程中可以释放致病毒素。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：探究不同的嗜线虫沙雷氏菌对拟异小杆线虫生长、繁殖和致病性的影响。
研究内容：挑取纯化s1，dr187和n19在培养基上划线，制备线虫生长培养基，接种经无菌处理的拟异小杆线虫rg卵悬液，每隔一段时间在显微镜下检测其发育状况，然后取处于侵染期的线虫去侵染大蜡螟幼虫，观察致病性。
拟解决的关键问题：提取无菌卵时，裂解常无法掌握要领，时间过长导致无菌卵裂解过度破损。
3. 研究的方法与方案
1、嗜线虫沙雷氏菌对拟异小杆线虫繁殖的影响挑取纯化s1，dr187和n19在9cm的牛肝培养皿上划线，制备线虫生长培养基，在25℃恒温培养箱中培养12h后，接种经无菌处理的拟异小杆线虫rg卵悬液，保证每皿接种量为10010颗卵，25℃条件下培养，设不同共生菌与线虫组合共3个处理，每个处理9皿，接种卵后3d-5d孵化后，再继续培养3d，每处理取3皿收集单菌线虫，在显微镜下检测是否发育为成虫及发育率；4d后每处理再取3皿收集单菌线虫，调查线虫在不同共生细菌中的雌雄比；卵孵化后15d后，每处理取3皿，调查不同处理中产生的侵染期幼虫的数量。
2、不同拟异小杆线虫与共生菌组合产生的侵染期幼虫与大蜡螟幼虫的致病关系依据 bonifassi[120]描述的方法，侵染期线虫的致病性可采用两种方法进行测定，将侵染期线虫注射到末龄大蜡螟幼虫体内或将大蜡螟暴露在侵染期的拟异小杆线虫中，然后将大蜡螟幼虫置于 25 ℃培养箱内：一是将 200 微升含 20 条侵染期线虫的林格氏溶液注射进入末龄期的大蜡螟幼虫体内，进行25个重复，并注射灭菌的林格氏溶液作对照，然后将大蜡螟幼虫置于 25 ℃培养；二是在铺有滤纸的直径10厘米的培养皿内加入侵染期幼虫，浓度为320ijs/ml，再放入10条末龄大蜡螟幼虫于25 ℃培养；记录大蜡螟死亡情况。
可行性分析：在本实验室研究中已经积累了广泛的线虫培养经验，技术也比较成熟。
4. 研究创新点
特色或创新之处首次针对S1，DR187和N19三种沙雷氏菌对拟异小杆线虫的生长发育和致病性进行研究。
进而总结出沙雷氏菌对拟异小杆线虫生长致病等影响的一般规律。
5. 研究计划与进展
2015.10-2015.11 查阅资料，整理实验思路，准备实验器材2015.11-2015.12 学习熟悉试验方法，分析结果，总结经验2016.03-2016.05 进一步实验研究共生菌对线虫生长发育及其致病性的影响
