1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
植物的许多基本功能是基于它自身的各种金属转运体来实现的,其中包括对各种金属离子的吸收、转运以及储存等。
nramp(natural resistance-associated macrophage protein)同系物是一种二价金属转运蛋白,在植物对金属离子的吸收、转运的方面起着十分重要的工作。
在紫花苜蓿中也存在着这类基因。
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2. 研究的基本内容和问题
得到紫花苜蓿中nramp7基因的序列以及其内含子及外显子。
并分析其在紫花苜蓿不同部位及不同时期表达的情况。
通过该极影分析紫花苜蓿与相近物种的亲缘关系。
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3. 研究的方法与方案
根据苜蓿的nramp基因设计出引物。
利用trizol试剂盒提取紫花苜蓿总rna,利用反转录酶及oligo dt将其总rna反转录成cdna。
以cdna为模板通过设计出的引物利用pcr技术将紫花苜蓿中的nramp7基因克隆出来。
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4. 研究创新点
通过同源克隆技术,得到紫花苜蓿中尚未登录的nramp7基因的dna及cdna序列。
通过定量pcr得到其在几个时期及各个部位的表达情况。
通过对其基因序列的生物信息学方法分析,得到其与相近物种之间的亲缘关系。
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5. 研究计划与进展
分别通过利用苜蓿dna与cdna为模板,利用同源克隆技术获得nramp7基因的序列。
通过对比两个序列得到内含子与外显子。
通过生物信息学的方法分析其与相近物种的亲缘关系。
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