苜蓿ATG13基因克隆与表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。

自噬相关基因即表达参与自噬过程的自噬相关蛋白的基因。

atg是一组保守的基因，参与自噬小体在细胞内的整个作用过程。

2. 研究的基本内容和问题

蒺藜苜蓿（Medicago truncatula）的基因组已被测序。

我们以蒺藜苜蓿中的ATG13基因两端序列作为探针，以紫花苜蓿（Medicago sativa）基因组和反转录cDNA作为模板对其克隆，并分析其序列特征，验证可能的功能。

3. 研究的方法与方案

1.引物设计：依据已经测序的蒺藜苜蓿（medicago truncatula）基因组，找到我们所要克隆的atg13，依据基因两端的序列利用软件oligo 7设计正反引物。

2.获取模板：以实验室培养的紫花苜蓿（medicago sativa）为原材料，用rna试剂盒提取rna，再将纯化的rna反转录成cdna，这将作为模板。

3.克隆atg13：用pcr试剂盒，以提好的cdna作为模板，用设计好的引物做温度梯度pcr。

4. 研究创新点

对自噬相关基因研究较多的是哺乳动物，而关于苜蓿的自噬相关基因研究较少。

将课题选为苜蓿希望能填补这一方面的空白。

5. 研究计划与进展

计划于2016上半年完成。