1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义:免疫细胞和免疫分子之间,以及与其它系统如神经内分泌系统之间相互作用,将免疫应答以最恰当的形式维持在最适当的水平。
事实上,由于实际免疫过程是由很多较为复杂的机制进行调控的,所以很难达到恰到好处的免疫稳态。
其中最典型的例子就是,在杀菌过程中,溶菌酶体会向胞外释放出活性氧,会导致严重的组织损伤。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容:本课题拟通过LPS诱导建立Wistar大鼠脾细胞或腹腔巨噬细胞的炎症模型,然后通过加入免疫抑制肽immunoregulin HA ,运用RT-PCR 的方法在分子水平水平探索免疫抑制肽immunoregulin HA 作用的相关信号通路(Erk1/2, SAPK/JNK, p38/ MAPK等);运用Western-blot的方法在蛋白水平探究Erk1/2, SAPK/JNK 或是p38/ MAPK 途径中的相应的磷酸化的蛋白p-IκB-α,p-p38, p-MKK4 和p-JNK 表达量,从而初步确定牛虻唾液腺免疫抑制肽immunoregulin HA作用的分子机制。
拟解决的关键问题:1. LPS模拟炎症模型的建立;2. LPS刺激对炎症相关信号通路中关键蛋白在mRNA水平和蛋白水平影响的时效与量效关系。
3. 研究的方法与方案
研究方法:运用rt-pcr 的方法在分子水平水平探索免疫抑制肽immunoregulin ha 作用的相关信号通路(erk1/2, sapk/jnk, p38/ mapk等);运用western-blot的方法在蛋白水平探究erk1/2, sapk/jnk 或是p38/ mapk 途径中的相应的磷酸化的蛋白p-iκb-α,p-p38, p-mkk4 和p-jnk 表达量。
技术路线:见附件 实验方案及可行性分析:实验室实验条件设备齐全,指导老师认真负责,实验室师兄师姐耐心指导。
之前已经详细查阅有关资料,并进行过相关预实验,因此本试验方案可行。
4. 研究创新点
特色或创新之处:首次从分子和蛋白层面同时解释免疫抑制肽作用的机理。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展:2015.9 - 2016.1查询有关资料,进行相关实验;2016.2 - 2016.5继续学习并掌握相关实验技能;2016.5 - 2016.6汇总实验结果,撰写毕业论文。
