β-淀粉酶的重组表达及酶学性质分析开题报告

 2021-08-08 20:12:33

1. 研究目的与意义

麦芽糖是碳水化合物的一种,由含淀粉酶的麦芽作用于淀粉而制得。

用作营养剂,也供配制培养基用。

此外麦芽糖味甘,性温,无毒。

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2. 国内外研究现状分析

长期以来植物来源 的大麦β-淀粉酶一直被广泛用于多个领域,自 1974 年 higashihara 等人首次确定巨大芽孢杆菌 (bacillus megaterium)胞外淀粉酶含有β-淀粉酶以来, 相继发现了几种能够产生该酶的微生物, 这些菌株 大都属于细菌, 如蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)、多粘芽孢杆菌(bacillus polymyxa)、环 状芽孢杆菌(bacillus circulan)、高温放线菌 (thermeoactinomyces sp.) 和热硫梭菌(clostridium thermosulfurogenes) 等。

现已知的微生物 β-淀粉酶大多为中温型,最适反应温度为 40-60℃;热硫梭菌(clostridium thermosulfurog)合成的β-淀粉酶最适反应 温度为75℃,但其为厌氧型菌株,生长温度为60 ℃,较为苛刻,并不适合于工业化生产的要求。

微生物发酵生产β-淀粉酶的方法,则是将β-淀粉酶克隆到表达宿主构建重组菌进行生产。

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3. 研究的基本内容与计划

研究内容:微生物获取β-淀粉酶并分析研究计划:1.获取β-淀粉酶生产菌种(基因工程构建)2.发酵(通过对菌种的发酵来得到含有β-淀粉酶的菌液)3.酶性质分析:通过实验测定酶的最适PH值、最适温度及稳定性4.简单的应用

4. 研究创新点

β-淀粉酶广泛存在于大麦、小麦甘薯、大豆等高等植物中,目前商品β-淀粉酶绝大部份均是从植物中提取的,芽孢杆菌β-淀粉酶生产量极低。

本课题的特色在于利用基因工程等手段构建菌种,来寻找高效、经济的微生物生产β-淀粉酶的途径,来实现β-淀粉酶的工厂化生产。

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