苯胺降解菌MC-01耐盐性及抗冲击能力的研究开题报告

1.本课题要研究或解决的问题

本课题主要研究的是苯胺降解菌的耐盐性，通过研究几种金属离子的添加对苯胺降解 解过程的影响，来找出最适合苯胺降解菌生长的金属离子及其浓度，对处理含有苯胺的工 工业废水有一定的参考作用。

2.苯胺降解菌耐盐性实验内容

2.1　金属离子贮备液

分别用FeCl₃ 6H₂O、NiCl₂ 6H₂O、ZnCl₂ 和CuSO₄5H₂O配制成含Fe³ 、Ni² 、Zn² 和Cu² 的不同质量浓度梯度的贮备液,根据试验用量使用。

2.2　试验菌种

苯胺降解菌采自实验室经过删选培养之后能够用来实验研究的菌种，菌种编号MC-01。

2.3 苯胺降解菌生长特性受盐离子影响的研究

2.3.1 不同盐离子对苯胺降解菌生长的影响

在若干个250 mL锥形瓶中装入50 mL LB液体培养基,向其中加入含不同盐离子（Fe³ 、Ni² 、Zn² 和Cu² 等）的贮备液，高压蒸汽灭菌，向培养基中加入苯胺，使苯胺浓度为300 mg/L，以4%的接种量向培养基中接入苯胺降解菌，35℃条件下，以160 r/min摇床培养24h，每隔若干小时取样测定OD₆₀₀，绘制苯胺降解菌生长曲线。

2.3.2 同种盐离子的不同浓度对苯胺降解菌生长的影响

在若干个250 mL锥形瓶中装入50 mL LB液体培养基,向其中加入不同浓度的同种金属离子贮备液，浓度分别为0%、1%、5%、10%、25%、50%，高压蒸汽灭菌，向培养基中加入苯胺，使苯胺浓度为300 mg/L，以4%的接种量向培养基中接入苯胺降解菌，35℃条件下，以160 r/min摇床培养24h，每隔若干小时取样测定OD₆₀₀，绘制苯胺降解菌生长曲线。

2.4 苯胺降解菌降解特性受盐离子影响的研究

2.4.1 不同盐离子影响试验

向活化培养基中以4%的接种量接入苯胺降解菌，于35℃，160 r/min条件下培养12 h。在若干个250 ml锥形瓶中各装入50 mlNacl浓度相同的无机盐培养基，高压蒸汽灭菌，将培养得到的菌液以12000 r/min离心3min，弃上层清液，用磷酸盐缓冲液冲洗,离心，获得下层菌泥，均以4%的接种量向无机盐培养基中接入菌泥，并向其中加入500 mg/L苯胺和适量的含不同盐离子（Fe³ 、Ni² 、Zn² 和Cu² 等）的贮备液，摇匀，160 r/min培养48h，测定其中的残留苯胺含量。

2.4.2 同种盐离子影响试验

向活化培养基中以4%的接种量接入苯胺降解菌，于35℃，160 r/min条件下培养12 h。在若干个250 ml锥形瓶中各装入50 mlNacl浓度相同的无机盐培养基，高压蒸汽灭菌，将培养得到的菌液以12000 r/min离心3min，弃上层清液，用磷酸盐缓冲液冲洗,离心，获得下层菌泥，均以4%的接种量向无机盐培养基中接入菌泥，并向其中加入500 mg/L苯胺和不同浓度的同种金属离子贮备液，浓度分别为0%、1%、5%、10%、25%、50%，摇匀，160 r/min培养48h，测定其中的残留苯胺含量。

2.5 苯胺浓度的测定

用已知浓度的苯胺溶液进行N-(1-萘基)乙二胺偶氮实验，测定其OD₅₄₅,绘制标准曲线；然后测定经苯胺降解菌降解48h的培养基上清液，根据测得的OD₅₄₅值在事先绘制好的苯胺标准浓度曲线上读取培养液中苯胺的浓度，得到被降解的苯胺量，从而得出在不同金属离子影响下的苯胺降解率以及同种金属离子不同浓度影响下的本案将几率。