PL17家族褐藻胶裂解酶AlyPL17的克隆表征开题报告

 2021-10-17 06:10

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述褐藻胶(alginate)是一种由巨藻、海带和马尾藻等褐藻中提取而得的高聚合度的酸性多糖,是细胞壁的主要组成物质。

目前,褐藻胶被广泛应用在食品、医药、日用化工和农业等领域,然而分子量较大,不易被机体吸收,使其进一步的应用受到限制,褐藻胶寡糖是褐藻胶经过降解而得到的一种低分子聚合物,具有溶解性好、稳定性强、易被吸收等优点,因此褐藻胶裂解酶的固定化对于推动褐藻寡糖酶法制取在工业上的应用意义深远。

本文综述了褐藻胶裂解酶pl-17家族的相关研究进展和其酶学性质表征及降解模式分析研究进展及其研究方法。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

需要研究或解决的问题:(1) 利用生物信息学软件对AlyPL17的序列相似性,进化关系进行分析;(2) 对AlyPL17的酶学性质,酶反应动力学,底物特异性进行表征;(3) 利用FPLC以及ESI-MS对AlyPL17的产物分布及作用模式进行表征;(4)利用分子对接软件结合生物信息学分析结果对酶与底物的选择性机制进行阐述。

研究手段:(1)对褐藻胶裂解酶AlyPL17重组表达载体构建以及相应表达纯化;(2)对褐藻胶裂解酶AlyPL17进行褐藻胶裂解酶AlyPL17克隆表达酶学性质表征研究;(3)利用同源建模及分子对接阐明酶与底物选择性机制;(4)查看相关书籍文献,阅读同家族褐藻胶裂解酶的相关文献。

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