蔗糖磷酸化酶重组大肠杆菌的高密度发酵研究开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述1.1 研究背景蔗糖磷酸化酶 (ec 2.4.1.7, sucrose phosphorylase, spase) 是一种催化转移葡萄糖苷键的特异性酶, 属于糖基水解酶13家族[1]。

该酶由于其极性强、结构稳定、具有特殊的催化性能，在食品、化妆品及医药等行业中得到了广泛的应用[2]，国内外市场对该酶的需求量较大。

目前关于蔗糖磷酸化酶蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中表达的研究国内少有报道。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1研究内容为了建立生物法制备gg规模化生产工艺，对基因工程重组大肠杆菌生产口蹄疫蔗糖磷酸酶的生产工艺进行了研究和优化，主要包括对蔗糖磷酸酶生产上游工艺即重组大肠杆菌的高密度高效表达研究（包括培养条件及工艺参数优化等）的研究，以改良生产工艺为手段，达到提高该酶质量及产量、降低生产成本、提高生产效率、扩大经济效益的目标。

本课题主要研究内容是在摇瓶培养和7.5l发酵罐培养条件下，对重组大肠杆菌的高密度发酵进行研究，包括培养条件及工艺参数优化等。

2.2研究流程2.2.1实验材料2.2.1.1重组实验菌株：本实验室自主立构建重组大肠杆菌bl21 / pet28a-spase菌株，实验前分别以平板和甘油管的形式储存于4℃和-70℃冰箱中。