1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
大量文献表明sod基因在果实成熟期间的基因表达对果实的物理化学性质产生了很大的影响。
因为sod具有清除生物体代谢所产生的超氧自由基的特异性,能够有效防止生物分子被氧化的能力,很大程度的减轻抑制果实在成熟期间所发生的大量氧化还原反应,从而会对果实在成熟期间的质地造成很大的影响,包括了果实的硬度,果实的色泽等。
sods是由多个同源蛋白组成的抗氧化酶类,它们构成了抵御活性氧(ros)的第一道防线,是最为重要的一类抗氧化酶,其能够催化o2-发生歧化作用生成氧气和过氧化氢,在保护组织免受ros危害上扮演了重要作用。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标:1.霞晖5号桃果实在低温贮藏阶段品质和生理生化的变化;2.霞晖5号桃果实SOD基因家族成员的克隆;3.霞晖5号桃果实在低温贮藏阶段SOD基因表达差异研究;研究的内容:本课题以霞晖5号桃果实为材料,研究了桃果实在低温储藏下生理生化水平的变化并采用生物信息学技术对SOD基因家族进行克隆分析,再应用Real-time RT-PCR等技术,对霞晖5号桃果实在低温贮藏阶段SOD基因表达差异进行研究。
拟解决的关键问题: 通过生理生化水平和基因水平结合分析,探索SOD基因家族在低温条件下桃果实成熟衰老过程中的调控作用。
3. 研究的方法与方案
本课题主要是运用实时荧光定量pcr等技术,研究在低温条件下桃果实成熟衰老的生理生化水平变化以及sod在表达水平的变化,实验方案如下:1、原料的选取实验采用的桃果实(品种:霞晖5号)采自江苏省农科院桃园,采后立即运回实验室,充分散去田间热后,选择果形整齐、大小均匀一致、无病虫害、无机械损伤且成熟度一致的果实作为实验材料。
并置于4℃下贮藏5周。
2.呼吸活力及乙烯释放在对二氧化碳和乙烯的测定中,每次将2个果实放入620ml密封罐中,在进行测定前先在2℃下放置1小时,再在20℃下放置20分钟,进行5次平行试验。
4. 研究创新点
本实验对霞晖5号桃果实的SOD基因家族进行克隆,并通过生理生化水平和基因水平结合分析,探索SOD基因家族在低温下桃果实成熟衰老中所起到的调控作用。
5. 研究计划与进展
2015年7月2015年9月:查阅相关文献,了解国内外研究现状,设计实验方案。
采集果实,进行热处理和冷藏及生理生化指标测定。
2015年10月2015年12月:对apx基因家族进行克隆 2015年12月2016年3月:对apx基因进行表达差异分析 2016年3月2016年5月:分析数据,撰写论文
