重组水蛭素融合蛋白在大肠杆菌中表达研究开题报告

 2021-10-28 08:10

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

水蛭素简介1884年,haycraft首次在欧洲医用水蛭的唾液腺里发现了一种生物活性物质水蛭素;1927年,shionoya最先把它作为抗血栓的有效药物来进行研究;1955markwardt指出其为蛋白物质,并命名为水蛭素。

水蛭素(hirudin)是水蛭(leech)及其唾液腺中已提取出多种活性成分中活性最显著并且研究得最多的一种成分,是由65个或66个氨基酸残基组成的单链多肽,相对分子质量为7000dalton。

水蛭素的n末端有3对二硫键,使n末端肽链绕叠成密集的环肽结构,对蛋白结构起稳定作用。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1.研究及解决问题本课题重组水蛭素融合蛋白的表达与纯化,将主要研究如何构建融合蛋白以及其表达与纯化条件,将重点解决该融合蛋白的表达条件以及纯化方法的问题。

综合研究表明,sumo融合技术在提高多肽和蛋白质的表达水平和溶解度方面非常有用,我们开发了一种新的细胞质表达方法,从大肠杆菌中纯化水蛭素。

sumo融合系统大大提高了表达效率,简化了纯化过程。

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