1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题的意义:脱氧核糖核酸(dna)是遗传信息的承担者,被称为生命体内的遗传物质。
具有存储和传递信息的功能,人类的许多遗传疾病都与dna分子中碱基序列的变异有关。
检测与疾病有关的变异对基因筛选、遗传疾病的早期诊断和治疗具有十分深远的意义。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标:DNA-walker的电致化学发光检测研究的内容:(1)DNA的溶剂缓冲液及DNA的配制(2)电致化学发光检测(ECL)的原理及方法(3)ECL反应体系的建立(4)加强ECL检测灵敏度的方法及原理(金-鲁米诺颗粒的利用)原理:由于具有较大的比表面积,纳米材料可以很好地作为各种生物分子的载体;其次,由于其良好的生物兼容性,纳米材料在作为固载平台的同时可以很好地保持生物分子的活性,如酶、蛋白质、核酸等;再次,基于其良好的导电性,纳米材料可以很好地促进体系的电子传递;另外,研究表明,很多纳米材料还具有各种特殊的催化功能(如,电催化、过氧化氢催化分解)等,所以可以利用贵金属纳米材料来提高检测灵敏度。
拟解决的关键问题:新型检测方法(ECL)对DNA-walker的检测的合理性及有效性,以及在ECL生物传感器构建过程中,如何有效地实现信号放大并提高检测灵敏度。
3. 研究的方法与方案
实验方法及方案:1.溶液的配制(1)pbs缓冲液 磷酸缓冲盐溶液作用:溶解保护试剂 称取17.907 g na2hpo412h2o和29.220 g nacl于烧杯中,溶解后,定容在500 ml 的容量瓶中,配制成0.1 m na2hpo4。
称取3.900 g nah2po42h2o和14.610 g nacl于烧杯中,溶解后,定容在250 ml 的容量瓶中,配制成0.1 m nah2po4。
在测ph值的同时向na2hpo4 缓慢滴加0.1 m nah2po4溶液,直至ph为7.4(2)tris-hcl缓冲液 三(羟甲基)氨基甲烷作用:用作核酸和蛋白质的溶剂①0.1 m tris-hcl 称取3.0285 g的tris 溶于烧杯后定容到250 ml 的容量瓶中,配制成0.1 m tris。
4. 研究创新点
可行性分析:1.课题研究内容科学可行,实验方案及技术路线合理。
2.本实验采用ecl生物传感器检测,其拥有较低的背景信号,较高的灵敏度以及良好的可控性,所以对dna应该有很好的检测效果。
综上所述,本项目一定能按照计划完成预期目标及研究内容。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展:2017.12.30-2018.01.06:搜集资料,整理文献,完成论文开题2018.02.25-2018.04.01:经预试验确定具体实验方案,完成试验内容2018.04.01-2018.05.30:处理数据,得出结论,撰写毕业论文2018.05.30-2018.06.30:准备毕业论文答辩
