烟粉虱细胞色素P450基因CYP6CX4的克隆与异源表达开题报告

 2022-01-27 03:01

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

研究意义:

烟粉虱广泛分布于热带及亚热带[1],是棉花、蔬菜和园林花卉等植物的主要害虫之一[2],给农业生产造成了巨大的经济损失。吡虫啉作为一种新型烟碱类杀虫剂,对烟粉虱有很好的防治作用,但随着吡虫啉大量施用,使得烟粉虱对吡虫啉产生了高水平抗性。研究烟粉虱对吡虫啉抗性产生原因对于烟粉虱的综合防治与农药的施用有重要意义。

国内外研究概况:

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标及内容:

研究目标:通过与吡虫啉抗性相关的基因的表达直接探究烟粉虱对吡虫啉产生抗性的原因。

研究内容:(1)烟粉虱p450基因cyp6cx4在昆虫细胞系sf9中的表达;(2)cyp6cx4对吡虫啉的代谢能力检测;(3)代谢产物的鉴定。

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3. 研究的方法与方案

研究方法及技术路线:

利用杆状病毒介导的昆虫细胞表达系统对细胞色素p450基因cyp6cx4进行异源表达,通过其表达产物对吡虫啉的代谢作用分析其在烟粉虱对吡虫啉抗性产生中的作用。

实验方案(主要包含以下步骤):

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4. 研究创新点

本实验研究对象具有创新性。细胞色素P450基因CYP6CX4的表达上调与烟粉虱对吡虫啉抗性相关,该基因能够代谢吡虫啉还没有被报道。

5. 研究计划与进展

2015年1月-2015年2月 准备相关资料,学习相关实验并完成文献综述的写作

2015年2月-2015年3月 完成含目的基因的重组载体的构建

2015年3月-2015年4月 完成对昆虫细胞的转染及病毒株的分离提取

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