基于芘-卟啉体系荧光阵列传感器的开发与肝素检测应用开题报告

 2022-02-02 21:59:27

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题意义:

糖胺聚糖 (gags),也称粘多糖,是具有人类健康关键生理学和药理学作用的阴离子多糖,具有多种生物活性。它们是直链多糖,为不分支的长链聚合物,由含己糖醛酸 (除透明质酸外) 和己糖胺成分的二糖单元构成。二糖单位中至少有一个单糖残基带有负电荷的羧基或硫酸基,因此糖胺聚糖是阴离子,多糖链呈酸性。糖胺聚糖也有良好的生物学作用,如由于糖胺聚糖的亲水性强,对保持疏松结缔组织中的水分有重要意义;糖胺聚糖是多价阴离子,对k 、na 、ca2 、mg2 等有较大的亲和力,因此能调节这些离子在组织中的分布;透明质酸有很大的粘滞性,附在关节面上具有润滑和保护作用;有促进创伤愈合的作用。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标和内容:

1)首先设计和合成基于芘丁酸或芘甲酸与卟啉结合的荧光探针。

2)通过紫外测试以及荧光检测确定该荧光探针的光谱变化以及选择最合适的结合当量来进行下一步的实验。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:

典型的荧光探针由识别基团 (receptor) ,荧光基团 (fluorophore) 和连接二者的连接部分(spacer) 所组成。识别基团决定了探针分子的选择性和特异性,荧光基团则决定了识别的灵敏度,而连接部分则可起到分子识别枢纽的作用。荧光共振能量转移是指两个荧光发色基团在足够靠近时,当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态,在该电子回到基态前,通过偶极子相互作用,实现了能量向邻近的受体分子转移(发生能量共振转移)。fret是一种非辐射能量跃迁,通过分子间的电偶极相互作用,将供体激发态能量转移到受体激发态的过程,使供体荧光强度降低,而受体可以发射更强于本身的特征荧光(敏化荧光),也可以不发荧光 (荧光猝灭),同时也伴随着荧光寿命的相应缩短或延长。能量转移的效率和供体的发射光谱与受体的吸收光谱的重叠程度、供体与受体的跃迁偶极的相对取向、供体与受体之间的距离等因素有关。

基于以上探针基本构造和能量传递原理,我们计划对芘和卟啉进行修饰,得到特定的探针结构,并构建fret能量传递体系,从而进一步构建相应的荧光传感阵列,用于肝素等糖胺聚糖的检测研究。

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4. 研究创新点

1)以芘丁酸这一简单结构为基础进行荧光探针的构造,与生命色素“卟啉”构建FRET能量传递体系,构建荧光探针以进行多糖的检测,现关于芘的荧光探针用于检测肝素等糖胺聚糖物质的相关报道还较少。

2)利用该荧光阵列传感器进行多糖和生物分子以及肝素的鉴别,对比传统方法更便捷,探针的构造更简单,检测速度更快。且我们期望设计出能够选择性识别多种糖胺聚糖,并且能从多种生物分子物质中特异性识别出肝素的荧光探针。

5. 研究计划与进展

一、2019.12-2020.1 查阅文献资料,了解相关方面的知识。

二、2020.1-2020.2 确定实验方案及方法,配制储备液。

三、2020.2-2020.5 进行具体的实验设计和改进,进行荧光阵列传感器的探索以及多糖和生物分子的鉴别。

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