高活力N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的筛选及表达优化开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文献综述

酶越来越多的应用到人类的生活中。例如作为催化剂，在疾病诊断和临床治疗上。在蛋白质多肽合成、有机化学不对称合成以及医药、食品、卫生等领域具有重要意义。

n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶（n-acetylornithinedeacetylase，简称naoase；ec3.5.1.16）就是一种较为有效地拆分手性氨基酸的酶。它可以催化乙酰鸟氨酸转化成乙酸和鸟氨酸，在大肠杆菌体内的从谷氨酸到精氨酸的生物合成途径中起着重要的作用；在体外亦能催化n-乙酰蛋氨酸、n-乙酰丙氨酸、n-乙酰亮氨酸等其它酰基化的氨基酸[1-4]。用基因工程菌表达的脱乙酰基酶酶法拆分活性更高，酶源易得，成本更低，原则上拆分效能更好。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1本课题研究目的

n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶来源于大肠杆菌，具有拆分外消旋氨基酸的特性。该酶在手性拆分、医药及农业领域中都有非常重要的实际应用价值。

通过筛选菌种，得到具有最高活性的n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶，进一步对其表达和优化，为揭示其催化机理及n-乙酰鸟氨酸脱酰基酶的进一步工业应用提供理论指导。完成鸟氨酸脱酰基酶不同构建方式，不同批次保藏菌的活力测定工作：完成两种构建方式重组菌的活力筛选及再保藏；完成重组菌dh10b/arge-phsh的热激诱导条件优化。