高表达天冬氨酸脱羧酶原核体系的构建开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

引言

l-丙氨酸主要用于生化研究、组织培养、医学鉴定，食品添加剂等领域。工业上主要以l-天冬氨酸为原料，经脱羧、过滤、结晶干燥得成品。而天冬氨酸β-脱羧酶是该生产工艺的关键酶。本研究通过基因工程的手段构建高效表达体系，提高天冬氨酸脱羧酶的活性，改善工艺路线，节约生产成本。

1.1 l-天冬氨酸β-脱羧酶(l-aspartate-β-decarboxy-lase,ec4.1.1.12,asd或adl)是迄今为止自然界中发现的唯一氨基酸β-脱羧酶,它能催化l-asp脱羧生成l(α)-丙氨酸。目前已用来生产l-ala以及拆分dl-asp生产d-asp。自从mardashev和glad-kova(1948)首次报道在假分枝杆菌(pseudomyco-bacterium)中存在该酶后,在许多微生物中,如德阿昆哈假单胞菌pseudomonas dacunhae)、粪产碱菌(alcaligenesfaecalis)、醋酸杆菌(acetobactersp.)、无色杆菌(achromobactersp.)、产气荚膜梭菌(clostridium perfringens)、脱硫脱硫弧菌(desul-fovibrio desulfuricans)、小球诺卡氏菌(nocardiagloberula)、桔青霉(penicillium citrinum)、雅致小克银汉霉(cunninghamella elegans)中都发现此酶^[1]。此外,在无脊椎动物如蚕、小龙虾、龙虾[3]及哺乳动物的大脑、肾脏、肝脏中也都大量存在酶^[2]。asd的辅因子是5′-磷酸吡哆醛,以还原型连接到酶上。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本论文内容：

1. 具有asd酶基因的菌株的获取；

2. l-丙氨酸的定量检测方法的建立；