基于免疫检查点治疗性抗体的表达及体外功能检测开题报告

1. 研究目的与意义

本研究为了检测基于免疫检查点的抗体的功能，我们利用瞬时转染的方法表达功能性的抗体；然后从新鲜血液中分离人外周血单核细胞，并分选出cd4 t细胞。

通过cd3抗体和待测抗体对cd4 t细胞的激活作用，来检测待测抗体的免疫学功能。

cd3抗体可激活t细胞的第一信号，若待测抗体可激活t细胞的第二信号即共刺激信号，会激活cd4 t细胞形成克隆并分泌细胞因子，则证明待测抗体具有免疫学功能。

2. 国内外研究现状分析

目前国内外治疗性抗体的研究集中在作用靶点和生理活性功能上。

两个世纪前，人们将白喉杆菌培养上清中分离到的可溶性毒素注入马体内，得到的抗血清可以治疗白喉，这是第一个用抗体治疗的例子。

以后人们通过各种免疫手段获得了针对毒素，病毒，细菌乃至癌细胞的特异性抗体。

3. 研究的基本内容与计划

（1）查看相关文献，学习相关仪器使用；1-2周（2）学习细胞培养及相关无菌操作；3-4周（3）分离PBMC并分选出CD4 细胞；5周（4）用CD3和待测抗体刺激T细胞并设置对照；6-8周（5）检测T细胞增殖状况，形成克隆及细胞因子；9-11周（6）分析T细胞激活和细胞因子等相关指标；12-13周（7）论文撰写：14-16周

4. 研究创新点

（1）用小体积低密度的细胞液进行转染；（2）用密度梯度离心法分离PBMC；（3）采用阴性试剂盒分选T细胞；（4）ELISA中用SPP偶联物进行酶促反应。