1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
文献综述1．裂殖壶菌体内基因工程的研究进展dha 是大脑和视网膜组织中细胞膜的组成成分，在脑细胞形成的过程中，对婴儿大脑正常发育和成人大脑功能的正常发挥有着非常重要的作用，具有增强视力[1]、预防高血压[2]、抗炎、抗癌[3]等功效。
通过微生物发酵提取 dha 和 epa 成为了新的生产渠道，而裂殖壶菌就是一株高产dha的海洋真菌。
裂殖壶菌的油脂通常占干重的 70%以上， dha 含量可达到总油脂的 40%-60%。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究的主要内容利用crispr/cas9 技术构建裂殖壶菌尿嘧啶营养缺陷型菌株，使用cas9蛋白对pyrf基因进行敲除，构建尿嘧啶营养缺陷型菌株。
研究内容有：1探索裂殖壶菌中尿嘧啶的合成路径并寻找尿嘧啶合成过程中的关键酶。
2检测裂殖壶菌基因组，寻找关键酶基因序列3设计sgrna，实现cas9蛋白与靶基因的准确结合4构建crispr/cas9表达质粒，导入裂殖壶菌5设计选择性培养基筛选关键酶缺失型菌株拟采用的研究手段1确定尿嘧啶合成关键酶基因2构建cas9表达质粒3将相关表达质粒导入裂殖壶菌4筛选突变菌株
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