let-7家族在拟松材线虫不同龄期的差异表达开题报告

1. 研究目的与意义

拟松材线虫bursaphelenchus mucronatu属于侧尾腺口纲(secernentea)、滑刃目(aphelenchida)、滑刃科(aphelenchoidoidae)、伞滑刃属(bursaphelenchus)。

拟松材线虫最早由日本学者mamiya于1979年首次分离发现，由于拟松材线虫在形态上与松材线虫非常相近，因此受到较为广泛的关注。

mirna最早在线虫中发现，是一类内源基因编码的长度约为22个核苷酸的具有调控功能的非编码rna，具有组织特异性、时序性和高度保守性等特点，参与调解细胞早期发育，细胞分化和组织发育，参与调控基因表达等，可能在生命活动中起着非常重要的作用，对线虫的胚胎形成、生长、发育和行为都有十分深远和复杂的影响。

2. 国内外研究现状分析

（1）拟松材线虫（bursaphelenchusmucronatus ）是日本学者mamiya于1979年首次分离发现的一种松树寄生线虫。

该线虫与松树萎焉病的病原线虫松材线虫（b. xylophilus）在形态上十分相似（mamiya at el,1979）。

拟松材线虫起源于欧亚大陆，主要分布在东亚的日本、中国，欧洲的俄罗斯、瑞典、挪威、意大利、芬兰以及北美的加拿大等国家，寄主树种主要有欧洲赤松、海岸松、香脂冷杉、日本赤松、马尾松、云南松、华山松、黄山松等，其分布范围比松材线虫的分布范围广。

3. 研究的基本内容与计划

（1）2017.12.10―2017.12.20：阅读文献，搜集资料；（2）2017.12.10―2018.2.15：不同龄期拟松材线虫收集，撰写开题报告和综述；（3）2018.3.1―2018.4.20：miRNA提取及反转录，miRNA茎环引物设计，qRT-PCR 验证不同龄期let-7家族成员在拟松材线虫中的表达量；（4）2018.4.20-2018.5.20：试验数据采集与处理，使用spss13.0软件对实验结果进行分析；（5）2018.5.21-6.1：撰写毕业论文。

4. 研究创新点

（1）mirna最早在线虫中发现，对线虫的胚胎形成、生长、发育和行为有十分重要的影响，但目前mirna对拟松材线虫的生长发育调控的相关研究还未见报导。

（2）let-7最早是在秀丽隐杆线虫中发现的具有转录后调节功能的小分子rna，是mirna家族中的重要成员，已有研究证实let-7家族成员在调控细胞分裂和分化过程中发挥着重要作用。

本实验通过验证let-7家族在拟松材线虫不同龄期的表达量来研究let-7家族成员在调控细胞分裂和分化过程中发挥的作用。